martes, 31 de julio de 2012

PERFIL HEPATICO EN PERROS GERIATRICOS








UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL
FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA

TESIS

PRESENTADA AL HONORABLE CONSEJO DIRECTIVO COMO REQUISITO PREVIO A LA OBTENCIÓN DEL TÍTULO DE:

MÉDICO VETERINARIO Y ZOOTECNISTA

TEMA

DETERMINACIÓN DEL PERFIL HEPÁTICO DE PERROS GERIÁTRICOS MEDIANTE PRUEBAS ESPECÍFICAS DE LABORATORIO

AUTOR
LUIS ARTURO MOREIRA DELGADO

DIRECTOR DE TESIS:
Dr. ALFREDO MITE VIVAR.



GUAYAQUIL – ECUADOR
2012







































                                                                                   La responsabilidad por las ideas,
                                                                                 investigaciones,  resultados,    y  
                                                                                  conclusiones sustentadas en ésta
                                                                                   tesis comprenden exclusivamente
                                           al Autor.






UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL
FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA

TESIS

PRESENTADA AL HONORABLE CONSEJO DIRECTIVO COMO REQUISITO PREVIO A LA OBTENCIÓN DEL TÍTULO DE:

MÉDICO VETERINARIO Y ZOOTECNISTA

TEMA
DETERMINACIÓN DEL PERFIL HEPÁTICO DE PERROS GERIÁTRICOS MEDIANTE PRUEBAS ESPECÍFICAS DE LABORATORIO.


AUTOR
LUIS ARTURO MOREIRA DELGADO

DIRECTOR DE TESIS:
Dr. ALFREDO MITE VIVAR.

GUAYAQUIL – ECUADOR

2012


I







DEDICATORIA

Dedico este trabajo a mi familia, la que siempre tuvo una palabra de aliento y fue mi empuje para no claudicar.
A mis maestros; a todos y cada uno de ellos que dieron su aporte, a mis compañeros que jamás se fijaron en la diferencia de edad y me brindaron su amistad, de ellos aprendí mucho; a mis perros, a los que me dedicaré por el tiempo que DIOS lo permita.










Luis Arturo Moreira Delgado





                                                             II





AGRADECIMIENTO




Agradezco a DIOS en primer lugar que permitió que esto suceda, a mis maestros, por su aporte invaluable para la conclusión de este logro.
A mis familiares y amigos, gracias infinitas.










                                                                      Luis Arturo Moreira Delgado






III






CERTIFICACIÓN

Certifico que el presente proyecto “DETERMINACIÓN DE PERFIL HEPÁTICO DE PERROS GERIÁTRICOS, MEDIANTE PRUEBAS DE LABORATORIO”, fue realizado en su totalidad por EL SR. Luis Arturo Moreira Delgado, como requerimiento parcial para la obtención del título de Médico Veterinario y Zootecnista.

Guayaquil, 27 de Marzo del  2012




 

          
            Dr. Alfredo Mite                                                            Dr. Luis Placencio
              PRESIDENTE                                                  EXAMINADOR PRINCIPAL









 

      Dr. Oscar macías                                                                     Dr. Julio Decker
EXAMINADOR PRINCIPAL                                       EXAMINADOR SUPLENTE







IV































            

                                    












                                        La medicina actual no es consecuencia del devenir  histórico
                                        sino es su propia historia; por tanto, para el mundo actual  y
                                        del mañana es importante conservar la memoria de estas    -
                                        técnicas e instrumentos, y es también indispensable conser -
var el recuerdo de las instituciones médicas y de los  médicos ejemplares, que señalaron un rumbo, que dieron un paso adelante y que sembraron lo que hoy se cosecha diariamente.
                                                
                                                                                                        Dr. Eduardo Estrella








































                  

                                                                       El impacto en la salud humana es lo que
                                                                       más claramente  delimita la  visión    del    
                                                                       mundo de la medicina veterinaria y  me-
                                                                       jor define su importancia como profesión




                                                                                                                       SCHAWE
































                                                                        




                                                                           Nunca consideres el estudio como  una
                                                                           obligación sino como una  oportunidad
                                                                           para penetrar en el bello y   maravilloso
                                                                           mundo del saber.




                                                                                                             Albert  Einstain












































                                                     Es posible llegar a lo simple y elemental sin pasar
                                                     por lo complejo y  complicado pero es   imposible  
                                                     llegar a lo  complejo sin pasar    por lo  simple   y
                                                     elemental.

                                                                                                                PAVLOV









INTRODUCCIÓN

     Definir cuando un perro es Viejo es complejo, más que en seres humanos, o en gatos, ya que existen muchas razas y variaciones y este concepto varía según el animal que consideremos.

     Es un hecho perfectamente conocido que los animales de razas pequeñas y medianas tienen una esperanza de vida, en términos generales, superior a la de los animales de razas grandes y especialmente de razas gigantes. Por ejemplo los perros de raza Beagle  no es razonable considerarlos viejos antes de los 9-10 años, igual que un caniche o un fox terrier mientras que un gran danés o un san Bernardo son claramente viejos y deben ser incluidos como geriátricos a partir de los 7-8 años de edad.

     Si bien han sido señaladas distintas teorías sobre las posibles causas del proceso de envejecimiento; todavía no han sido debidamente definidos. Sin embargo si se conocen con detalles los principales efectos del envejecimiento sobre los distintos sistemas orgánicos estableciéndose un círculo vicioso que conduce a un deterioro progresivo de la salud del animal y que inevitablemente desemboca en su muerte.6
    Podrían considerarse 4 causas que pueden actuar según una secuencia programada:
Un reloj biológico controlado genéticamente, actúa sobre el sistema endócrino alterando los sistemas circulatorio e inmunitario; a su vez reduce la resistencia a las enfermedades como causas inmediatas de la muerte.

     Con el afán de  colaborar en algo a tratar de hacer llevadera la ancianidad de estos nobles animalitos, ponemos en consideración este trabajo, mismo que ha consistido en la determinación de un perfil hepático para animales geriátricos.
     Las enzimas son moléculas de naturaleza proteica que catalizan reacciones bioquímicas siempre que sean termodinámicamente posibles.23
      Se han evaluado los niveles de los principales indicadores de daño hepático y biliar así como de la albúmina sérica que se sintetiza en el hígado y que la determinación de sus niveles complementa este trabajo.



-          Alanino aminotransferasa (ALT).
También llamada transaminasa glutámico pirúbica: indicador específico de patologías hepáticas en pequeños animales.13
-          Aspartato aminotransferasa (AST).
También conocida como transaminasa glutámica oxalacética, indicador de patologías hepáticas y/o musculares en grandes y pequeños animales.
-          Fosfatasa alcalina (FAS).
Indicador de colestasis en perros, indicador de enfermedad hepática no específico para animales grandes.
-          Albúmina sérica:
Importante proteína sintetizada en el hígado, permanece en circulación unos 19 días, hasta que es metabolizada en los tejidos para los que es fuente de aminoácidos. La determinación de sus niveles junto a las transaminasas antes mencionadas conforma este perfil hepático geriátrico.
-          Este trabajo será de una gran importancia para los tenedores de perros gerontes quienes son los primeros preocupados por el bienestar de sus mascotas.



















II.                 OBJETIVOS

2.1  OBJETIVO GENERAL.

Ø  Evaluar el perfil hepático en perros geriátricos mediante pruebas específicas de laboratorio.



2.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS.

Ø  Determinar los valores enzimáticos, de Alanino amino transferasa (ALT), Aspartato amino transferasa (AST), fosfatasa alcalina (FAS), y albúmina sérica (ALS).

Ø  Evaluar el perfil hepático de acuerdo a la edad, tamaño, sexo, condición clínica y conducta alimenticia.


     














III.             MARCO TEÓRICO


3.1     Generalidades.

 PERFIL BIOQUÍMICO

Es la medición de ciertos analitos o sustancias que se encuentran en la sangre y que nos da información sobre el estado de los distintos órganos.
El perfil bioquímico brinda  información bastante ajustada y específica para evaluar la respuesta a un tratamiento y para monitorear la evolución de una enfermedad a lo largo del tiempo. No brindan por si solo un diagnóstico ni un pronóstico, pero ayudan, junto a la evaluación clínica del paciente por parte del veterinario a tener una idea acabada de su estado actual. Sobre el funcionamiento de los riñones, el hígado, glándulas adrenales, páncreas y sobre la presencia de algunos tipos de tumores.1

3.2   BIOQUÍMICA SANGUÍNEA

Aunque la interpretación de los resultados en Bioquímica plasmática es bastante específica para cada constituyente en particular, existen unos principios básicos generales que se pueden seguir.
El plasma es basicamente un fluido extra celular en movimiento, que transporta un gran número de sustancias desde sitios de absorción o producción, a sitios de utilización o excreción; una vez que tenemos el resultado contrastado, el primer factor en que debemos  pensar debe ser si existe alguna razón, para que esta sustancia esté en el plasma, es decir si su presencia está justificada o no. El paso siguiente debe ser saber de dónde viene y adonde va esta sustancia, es decir cuáles son los mecanismos responsables de su incorporación, de su eliminación del plasma, y el control de dichos mecanismos.
A partir de aquí no nos será difícil empezar  a diferenciar las causas de la existencia de concentraciones anormales de cualquier sustancia. Unas concentraciones anormalmente bajas, pueden ser debidas, bien a una incorporación del plasma disminuido (un deterioro en la síntesis, deficiencia nutricional, pobre absorción, falta

de precursores…..) o bien a un aumento de su eliminación plasmática. (demanda excesiva, excreción excesiva, pérdidas patológicas…).  Al contrario unas concentraciones anormalmente altas; pueden ser debido bien a: un aumento de su incorporación al plasma (aumento de la producción o de la entrada, liberación patológica del compartimento intracelular…) o bien a una disminución de su eliminación plasmática (disminución de su utilización, excreción impedida…)2

3.3   ÁCIDOS BILIARES

Los ácidos biliares  (AcB) son  sintetizados en el hígado a partir del colesterol y se conjugan con taurina o glicina antes de su excreción como sales biliares en la bilis. La acción bacteriana en el intestino deconjuga algunos  ácidos biliares, estos productos entran a la circulación portal y son extraídos y reciclados por los hepatocitos.
Si estos ácidos biliares no son extraídos son medidos en sangre periférica; la medición de los (ACB) es un test sensible de función hepática.

TEST COMPLEMENTARIOS: los niveles de ACB deben determinarse junto a los otros test de daño hepato celular o de función hepática.

3.4 ESTUDIO DE QUÍMICA SANGUINEA.

Estudios de química sanguínea, perfil hepático básico incluye la medición de la actividad de las principales enzimas presentes en los hepatocitos, y que normalmente se detectan en concentraciones bajas cuando no hay daño hepático, pero al haber algún insulto que destruya hepatocitos (infecciones, tóxicos, etc.), se liberan estas enzimas hacia la sangre.
Además incluyen  a la albúmina que es la principal proteína sanguínea sintetizada en el hígado y por lo tanto nos da una valoración indirecta del funcionamiento hepático de manera muy somera.3




ANALITO                                                 REFERENCIA EN CANINOS

ALT                                                                                U/L    4-66
FAS                                                                                U/L    0-88
ALBÚMINA                                                                  MG/DL  23-40


3.5 PERFIL HEPÁTICO COMPLETO

Este perfil, además de valorar la actividad de las enzimas hepáticas y albumina mide los elementos estrechamente relacionados con la actividad hepática, para dar más información sobre el grado de daño hepático o causa probable.


ANALITO                                                 REFERENCIA EN CANINOS


ALT                                                                                                                 4-66  U/L
FAS                                                                                                                 0-88  U/L
BUN                                                                                                          6-20  MG/DL
UREA                                                                                                     20-40  MG/DL
GLUCOSA                                                                                         70-100    MG/DL
COLESTEROL                                                                                   125-250 MG/DL
BILIRRUBINA TOTAL                                                                    0.07-1.0 MG/DL
BILIRRUBINA DIRECTA                                                                0-0.14    MG/DL
BILIRRUBINA INDIRECTA                                                            0-0.9      MG/DL
RELACIÓN BD/BI                                                                             0.2-0.4
PROTEINA TOTAL                                                                             5.4-7.5     G/DL
ALBÚMINA                                                                                         2-3.0        G/DL
GLOBULINAS                                                                                     2.5-4.5     G/DL
RELACIÓN     A/G                                                                              0.7-1.3



3.6  BIOQUÍMICA CLÍNICA

El bioquímico clínico desempeña un papel especial en el diagnóstico y seguimiento de los pacientes. El bioquímico clínico debe ser, en primer lugar un analista fiable y respetado que proporcione sus resultados con rapidez que requiere el estado clínico del paciente y el diagnóstico sospechado; sin embargo debe ser también un profesional a la vanguardia de los científicos que desempeñan un papel cada vez más importante en el equipo interdisciplinario implicado en el diagnóstico y seguimiento del enfermo que caracteriza a la medicina moderna.
Las sociedades científicas más antiguas dedicadas al estudio de la bioquímica clínica aparecieron después de la segunda guerra mundial, coincidiendo en el tiempo con el desarrollo extraordinario que tuvo esta disciplina en la década de los cincuenta, sin embargo la aplicación de la bioquímica a la medicina se remonta a por lo menos tres siglos atrás.
A comienzos del siglo xix ya se disponía de medios analíticos que permitían el análisis de muchos constituyentes bioquímicos de la orina y, varios en la sangre con razonables prestaciones analíticas.
En el ámbito internacional, la denominación más aceptada es química clínica, denominación que fue utilizada ya en 1883 por C. H. Ralfe como título de un libro que trataba del análisis químico de sangre, orina y tejidos sólidos, comentando los cambios inducidos por la enfermedad.
En 1.891 Bourget  publicó en lausanne un manual de chimie clinique, en 1.912 Johan Scherer denominó a su laboratorio en el Julio`s hospital de Wurzburg Alemania, como ¨das Klinisch Chemische Laboratorium¨.
En 1.955 se fundó la federación internacional de sociedades científicas, que adoptó el nombre de ¨International Federatium of clinical chemistry¨.

3.6.1 LA BIOQUÍMICA Y SU CAMPO DE ACCIÓN

La bioquímica clínica comprende el estudio de los procesos metabólicos en relación a los cambios tantos fisiológicos como  patológicos o  los inducidos    por maniobras terapéuticas.

Para este estudio la bioquímica clínica aplica los métodos, técnicos y procedimientos de la química y bioquímica analítica, con el propósito de obtener y participar en la interpretación de la información útil para la prevención, diagnóstico y evolución de la enfermedad, así como de su respuesta al tratamiento.

3.6.2  BIOQUÍMICA CLÍNICA SEMIOLÓGICA

    El bioquímico clínico debe conocer los factores que afectan a los valores de las magnitudes bioquímicas tanto analíticas como biológicas. Respecto al primero debe saber cómo fijar los objetivos de calidad y como controlar las posibles desviaciones.
Respecto a los segundo, su conocimiento le permitirá reducirlos y si ello no es posible, tenerlos en cuenta cuando deba proceder a interpretar los resultados.4

3.6.3  BIOQUÍMICA CLINICA EN MEDICINA VETERINARIA.

      La bioquímica clínica representa una herramienta importante en las investigaciones que conducen al diagnóstico de las enfermedades de los animales domésticos, puede ser definido como un conjunto de determinaciones que se emplean para efectuar un diagnóstico, un pronóstico y una evaluación de una enfermedad; se deben señalar algunos criterios generales a tener en cuenta por el médico veterinario cuando utiliza los análisis clínicos en su laboratorio como instrumento de diagnóstico. Así se deben considerar los criterios de calidad según el usuario y el laboratorio.
Para el laboratorio se deberán tener en cuenta: sensibilidad, exactitud, precisión, confiabilidad, especificidad, rapidez, simplicidad, practicidad, y costos. También se considerarán distintos niveles de control de calidad.
 Todas estas acciones estarán dirigidas a efectuar análisis clínicos de calidad y confiables apuntando a lograr la excelencia en el diagnóstico.5


3.6.4 OBJETIVO DE LA BIOQUÍMICA CLÍNICA



      El objetivo de la bioquímica clínica es detectar normalidad o anormalidad en los constituyentes del organismo.

FINALIDAD:
La finalidad es permitir la interpretación de las modificaciones bioquímicas observadas durante las distintas patologías para realizar un diagnóstico acertado.
Los análisis clínicos se pueden clasificar  de acuerdo a sus niveles de complejidad en:
Ø  ANÁLISIS DE RUTINA: son los que solicitan habitualmente, son los más comunes y se realizan a modo orientativo y exploratorio, ej: hematocrito, proteínas séricas totales, albúminas.
Ø  ANÁLISIS ESPECIALES: Son aquellos que se realizan cuando se presume una patología determinada ejemplo: minerales en sangre, enzimas hepáticas.
Ø  ANÁLISIS ESPECIALIZADOS: son los que requieren técnicas, metodología instrumental complejo ejemplo: dosaje de hormonas, vitaminas.5

3.7   FISIOPATOLOGÍA DEL ENVEJECIMIENTO

 Aunque indudablemente el envejecimiento se trata de un complejo proceso biológico que no debe ser considerado como un proceso patológico; no es menos cierto que con el paso del tiempo se va a producir toda una serie de fenómenos que actúan como factores perjudiciales para el correcto mantenimiento de un buen estado de salud.
Es precisamente en este periodo cuando los factores perjudiciales del envejecimiento, se manifiestan por una disminución de la capacidad funcional y por un aumento de la mortalidad del que se ocupa la especialidad de la medicina denominada geriatría.6

3.7.1 RITMOS BIOLÓGICOS.-

      Los ritmos biológicos tienen un origen genético y se encuentran afectados por sincronizadores, así el reloj biológico puede estar ajustado   por diferentes   estímulos



ambientales desde el ciclo luz-oscuridad, hasta cambios en la temperatura, el consumo de alimentos, etc.
En condiciones constantes de laboratorio, diversos ritmos continúan expresándose durante días, meses o años, estos ritmos en el libre curso son la expresión de relojes biológicos endógenos.20
Si bien han sido señaladas distintas teorías sobre las posibles causas del proceso de envejecimiento; todavía no han sido debidamente definidas. Sin embargo sí se conocen con detalles los principales efectos del envejecimiento sobre los distintos sistemas orgánicos, estableciéndose un círculo vicioso que conducen a un deterioro progresivo de la salud del animal, y que inevitablemente desemboque en su muerte.
La muerte natural de un individuo se podría considerar como el resultado de cuatro causas que pueden actuar según una secuencia programada; un reloj biológico controlado genéticamente, actúa sobre el sistema endócrino alterando los sistemas circulatorio e inmunitario, esto a su vez reduce la resistencia a las enfermedades como causas inmediatas de la muerte.6
     Como se ha señalado anteriormente en el proceso del envejecimiento está involucrado una amplia variedad de factores tanto endógenos como exógenos. Los factores endógenos son determinantes para que este proceso suceda durante toda la vida, tanto a nivel celular y tisular como a nivel de toda la economía orgánica en su conjunto; los factores exógenos van a influir en el ritmo y velocidad con que se producen el proceso de envejecimiento, acelerando los cambios involutivos y acortando la supervivencia cuando estos son desfavorables.
A continuación revisaremos estos dos tipos de factores.

Ø  FACTORES ENDÓGENOS

La actuación de los factores endógenos proporciona al proceso de envejecimiento sus principales características. El envejecimiento es una propiedad intrínseca de todo organismo vivo que tiene un carácter universal, y que afecta a todos los individuos, es progresivo, pues los cambios que conlleva se acentúan con la edad; y por último resulta perjudicial porque conduce inevitablemente a la muerte.



No se conoce con exactitud cuál es el mecanismo de activación de cada uno de los factores endógenos, habiéndose establecido   distintas hipótesis sobre la teoría del envejecimiento. En líneas generales estas teorías se pueden resumir, dividiéndolas en las que interpretan que el envejecimiento está programado en el genoma; y los que atribuyen a una acumulación de errores causales.
Una teoría no excluye a la otra y ambas se basan en el desarrollo de mecanismos innegables, por lo que parece lógico pensar, que estos dos tipos de mecanismos refuercen el proceso de envejecimiento.

Ø   PROGRAMACIÓN GENÉTICA.

    Según esta teoría, lo mismo que hay genes que dirigen el desarrollo,  existirán otros que adquiriendo su expresión, en el momento oportuno inducen a la involución.
Es evidente que cada célula del organismo tiene una limitación de supervivencia regida genéticamente.
Lo que determina que estos genes del envejecimiento actuando sobre cada célula o a través de los sistemas reguladores, influyan aisladamente sobre los distintos órganos por ejemplo: la involución de los ovarios, al llegar a la menopausia está programada en la expresión genética y conjuntamente sobre todo el organismo otorgando una longevidad máxima a cada individuo  propia de cada especie animal.
Este fenómeno es más evidente en ciertos insectos o peces que mueren inmediatamente después de reproducirse en los últimos años se han producido grandes avances en el conocimiento de la apoptosin, mecanismo de muerte celular selectiva regulada genéticamente e implicado en los procesos de diferenciación y desarrollo normal de la célula.
Este proceso que induce selectivamente el suicidio de la célula a nivel individual es fundamental para controlar tanto el número. Como la forma y composición de un tejido u órgano.
Actualmente se conocen con cierto detalle los mecanismos y características morfológicas de esta otra forma de muerte celular, habiendo sido descubiertos genes que regulan e intervienen este proceso.



Falta por descubrir el mecanismo por el cual la expresión de toda esta información genética conduce a un deterioro progresivo anatómico y funcional de un ser vivo en su conjunto.
Entre las hipotéticas posibilidades de que los genes del envejecimiento actúen a través de los sistemas reguladores orgánicos nerviosos endócrino e inmunitario, solo este último parece ser causa del envejecimiento por sí mismo. La teoría inmunológica del envejecimiento se basa en la propia involución anatómica y función al que sufre el sistema inmunitario (timo) después de la madurez sexual y que progresa con la edad, lo que conduce con el paso del tiempo a la presentación de un insuficiente respuesta frente a antígenos extraños (inmunodeficiencia) y sobre todo una tendencia a agresión de sus propias estructuras (autoinmunidad).
Aunque parece paradójica la coexistencia de estos dos tipos de procesos, inmunodeficiencia y su autoinmunidad, existe toda una serie de hechos comprobado empíricamente a favor del fenómeno inmunitario del envejecimiento. Tanto la presentación de enfermedades autoinmunes tanto como lupus eritematoso, artritis reumatoides etc. Como una mayor sensibilidad a los procesos infecciosos son características de los animales viejos.

3.7.2 ACUMULACIÓN DE ERRORES PRODUCIDOS POR EL AZAR.

Estos errores van a afectar a la estructura molecular de los distintos componentes orgánicos (ADN, ARN, Proteínas, etc). Lo que significa que puedan surgir mutaciones, defectos bioquímicos etc.
Que limitan la función y la supervivencia de la célula hecho que a su vez tendría un efecto multiplicador sobre  el organismo. En este sentido se han sugerido distintas teorías; como la formación de enlaces cruzados entre las moléculas de proteínas y ácidos nucleicos con el paso del tiempo, como los que sufren las fibras de colágeno lo cual explica la formación de arrugas en la piel.
También se describe la teoría del acúmulo progresivo de productos de desechos, que actúan inhibiendo el crecimiento y el metabolismo celular. Las reacciones de las enzimas celulares y su síntesis se hacen cada vez más lento



Los mecanismos de reparación de las macromoléculas se vuelven menos eficaces, por lo que las alteraciones que ocurren en ellas son reparadas defectuosamente.
Además del daño celular las relaciones entre las células comienzan a alterarse destruyéndose los mecanismos de retroalimentación que regulan las funciones celulares en el eficiente organismo multicelular.  Entraríamos en el campo de la patología molecular.
      Si bien los agentes responsables de estos procesos no son adecuadamente producidos, algunos de ellos podrían actuar en el proceso de envejecimiento, como los radicales libres de oxígeno que por su alto potencial reactivo, son capaces de dañar a todos los componentes de la célula y las macromoléculas extracelulares.
Dos hechos comprobados desde hace tiempo apoyan a esta teoría: los agentes antioxidantes que inhiben la producción de radicales libres, retrasa el envejecimiento en animales de experimentación, y la concentración de estos agentes antioxidantes orgánicos, como la superoxidodimutasa, disminuye con la edad; en la actualidad esta teoría ha recobrado un gran interés dentro de las laderas de la medicina humana, siendo objetivo de estudio e investigación el papel de los antioxidantes como preventivos del envejecimiento6.

Ø  FACTORES EXÓGENOS.
     Aunque el envejecimiento presenta la característica de ser un proceso intrínseco de la vida, es decir independiente del medio externo, no es menos cierto que este influye decisivamente en su desarrollo.
Muchos son los factores exógenos que influyen sobre el envejecimiento; todos ellos constituyen el medio ambiente y manejo que sufre cada animal en particular. Factores externos a los que debe adaptarse para mantener un buen estado de salud y que frecuentemente puede ser causa de enfermedad.
     La alimentación, la climatología, las características del entorno, los cuidados, etc,  son factores que aún sin causar enfermedad clínica, pueden influir desfavorablemente acelerando los cambios en la estructura y función que sufren los distintos tejidos y órganos como consecuencia del envejecimiento, entre los factores ambientales, la dieta y la temperatura han sido objeto de algunas observaciones en animales de laboratorio.


 Se ha comprobado como el ritmo de envejecimiento en las ratas puede disminuirse por restricción dietética, proporcionando un crecimiento más lento en los animales pero una mayor longevidad. Estos mismos animales sometidos a un ambiente de baja temperatura, sufren una disminución neta de su longevidad.
Estos resultados confirman la clásica teoría del ritmo de vida de Pearl (1928). En el sentido de que la duración de la vida es inversamente proporcional a la intensidad del
gasto energético. En base a esta teoría  podrían considerarse la influencia de los factores externos en el envejecimiento de un individuo, acelerando el proceso todos aquellos que provocan una mayor actividad metabólica en el organismo.
Este hecho resulta especialmente evidente en los animales. En patología veterinaria interesa especialmente la fatiga funcional, consecuente con unos requerimientos excesivos y duraderos de producción a los que están sometidos la mayoría de los animales domésticos. Cuando requieren un sobre esfuerzo fisiológico se llega con facilidad al agotamiento patológico que conduce por lo general a un envejecimiento prematuro, con una incapacidad y disminución de las defensas naturales frente a todo tipo de enfermedades.
      Considerando la interacción de todos estos factores podemos definir al envejecimiento como un proceso que supone cambios morfológicos y funcionales de todos los órganos que conducen a una composición corporal  particular  y diferente  a
la que presentaba en periodos anteriores y consecuentemente, la coordinación de las funciones y la capacidad de adaptación se ven cada vez más comprometidos.
Todos los sistemas metabólicos y de regulación orgánica (nervioso, endócrino, inmunitario) van declinando su función con el paso del tiempo, lo que provoca una menor capacidad para mantener el equilibrio interno del organismo.
La totalidad de los órganos (tejidos y células) del cuerpo ven comprometida su función con el paso del tiempo, a consecuencia bien de lesiones directas o bien provocadas indirectamente por una alteración de mecanismos reguladores.  El resultado final es la presentación simultánea de disfunciones y lesiones progresivas en muchas ocasiones con un carácter irreversible.6

3.8  EFECTOS METABÓLICOS Y   FISIOPATOLÓGICOS       DEL    ENVEJECIMIENTO.


     
Ø  Descenso de la tasa metabólica con una menor actividad y una disminución entre 30-40 % de las necesidades calóricas.
Ø  Inmunodeficiencia a pesar de un número normal de linfocitos.
Ø  Descenso de la fagocitosis y quimiotaxis, con disminución de las defensas frente a las infecciones.
Ø  Forma clon de auto anticuerpos y presentación de enfermedades autoinmunes.
Ø  Incremento del porcentaje graso corporal.
Ø  Hiperpigmentación, engrosamiento, pérdida de la elasticidad de la piel.
Ø  Hiperqueratosis de las almohadillas plantares y uñas quebradizas.
Ø  Pérdida de la masa muscular, ósea y articular con el consecuente desarrollo de artritis.
Ø  Sarro y cálculos dentales, con pérdida de dientes e hiperplasia gingival.
Ø  Periodontitis que produce la retracción y atrofia gingival.
Ø  Atrofia y fibrosis de la mucosa gástrica.
Ø  Disminución del número de hepatocitos y desarrollo de fibrosis hepática.
Ø  Descenso de la secreción de enzimas pancreáticas.
Ø  Pérdida de elasticidad pulmonar, fibrosis pulmonar y mayor viscosidad en la secreción de las glándulas respiratorias, disminución de la capacidad respiratoria.
Ø  Tos refleja y descenso de la capacidad respiratoria.
Ø  Pérdida de peso de los riñones, descenso del filtrado gromerular    y atrofia de las túbulas renales.
Ø  Desarrollo de incontinencia urinaria.
Ø  aumento de tamaño de la próstata, atrofia testicular y prepucio pendulante.
Ø  Engrosamiento de los ovarios y fibroquistes y neoplasias en glándulas mamarias.
Ø  Descenso del gasto cardiaco y desarrollo de fibrosis valvular y arterosclerosis coronaria.
Ø  Acumulo de grasa e hipoplasia de la médula ósea, desarrollo de anemia no regenerativa.
Ø  Disminución del número de células del sistema nervioso. La senetud causa pérdida del adiestramiento.
Ø  Disminución del número y desarrollo de fibrosis hepática.

Normalmente las enfermedades hepáticas muestran signos clínicos muy poco específicos (pérdida de peso, anorexia, vómitos, diarrea. Poliuria-polidipsia, anemia moderada no regenerativa.
Esta es una de las razones por las que el diagnóstico de las enfermedades hepáticas es francamente un reto, incluso para clínicas muy experimentadas.
Sabemos que el hígado juega un papel primordial en el metabolismo y en la destoxificación por lo que sufre en consecuencia numerosas enfermedades secundarias cuyas causas primarias residen en otros distritos orgánicos.
Este órgano tiene un suministro sanguíneo muy peculiar que viene tanto de la arteria hepática como de la vena porta. Estos dos riegos sanguíneos están en un equilibrio dinámico y cada uno de ellos puede variar entre el 30% y el 20 % dependiendo de varios factores fisiológicos (alimentación, presión sanguínea). Varias enfermedades (disfunciones cardiacas y pulmonares, problemas de circulación hepática, congénitos o sobre venidos) pueden afectar la circulación hepática, perjudicando su metabolismo.
El hígado tiene la capacidad de regenerarse y una amplia reserva funcional de manera que aunque este severamente dañado, las pruebas de laboratorio pueden ser normales o casi normales y los síntomas clínicos pueden estar ausentes o pueden ser pocos.
Por estas y otra razones es muy importante alcanzar un diagnóstico preciso cuando las pruebas de laboratorio sobre el hígado son anormales, es necesario distinguir en particular entre marcadores de daño hepático y pruebas funcionales del hígado.
 Este es el primer paso para identificar una enfermedad hepática primaria o secundaria.
Los marcadores principales de daños en el hígado son las enzimas hepáticas ALT, AST, AP, GT. Están localizadas en diferentes distritos de células hepáticas y es posible medirlos en el suero cuando el hígado esté dañado por fugas o necrosis, pero estos daños pueden deberse a una enfermedad hepática primaria o secundaria. Además no todas estas enzimas son específicas del hígado y por ello pueden ser altas en el suero en otras situaciones patológicas o fisiológicas.7


Una de las preguntas que los médicos veterinarios se hacen más seguido es si se esta desarrollando o no una hepatopatía en un determinado paciente. Desafortunadamente los signos más corrientes de enfermedad hepática (por ejemplo: anorexia, letargia, depresión, vómitos intermitentes, pérdida de peso) también se observan habitualmente en otras enfermedades. Un nivel alto de ALT, y/o FAS indica que existe una enfermedad hepática pero cuando los valores encontrados son normales no se la puede descartar.
Considerar la forma y el tamaño del hígado nos puede ayudar a aproximarnos al diagnóstico. Los dos puntos más importantes son:
a)      Existen evidencia de enfermedades hepática focal.
b)      El hígado es de tamaño mayor o menor de lo normal.
Si podemos hacernos estas dos preguntas, entonces existe evidencia de enfermedad hepática.
Si el hígado está evidentemente reducido y no existe fundamento para buscar una enfermedad adquirida, se debería considerar la posibilidad de un shunt porto sistémico aunque el paciente sea de mediana o mayor edad. Igualmente no todos los perros con severa microhepatía tendrán cirrosis o shunt portosistémico.8

3.9 HEPATOPATÍAS NO INFLAMATORIAS.

Ø  Alteraciones vasculares hepáticas.-
     Las alteraciones vasculares del hígado aparecen con mayor frecuencia en el perro que en el gato y algunas no han sido descritas, las alteraciones que presentan una mayor incidencia en la clínica son los shunts portosistémicos y la congestión hepática pasiva.
Los shunts portosistémicos son comunicaciones vasculares anormales entre el sistema venoso portal y la circulación  sistémica, se originan en la vena porta principal o en sus tributarias y desembocan en la vena cava caudal en un 87% en perros y en la vena ácigos en un 13%. Los shunts portosistémicos pueden ser adquiridos o congénitos.
     La consecuencia fundamental de un shunt porto sistémico es que parte de la sangre de la vena porta que normalmente representa el 60-70% del  flujo sanguíneo hepático alcanza la circulación sistémica, a través del shunt, sin pasar previamente por el hígado. Al hígado llega entonces menos sangre por la vena porta y aunque la arteria hepática aumenta el flujo sanguíneo considerablemente puede suceder que el hígado reciba un menor aporte sanguíneo total.9
Así mismo disminuye la llegada al hígado de factores hepatotróficos procedentes del tracto gastrointestinal y del páncreas (insulina, factores de crecimiento semejantes a la insulina, glucagón y factor de crecimiento los hepatocitos) que son los responsables de mantener la capacidad de hipertrofia e hiperplasia de los hepatocitos, estas dos alteraciones conducen a una atrofia difusa y progresiva del hígado que provoca una disminución de la funcionalidad hepática.9
Otra consecuencia muy importante es que a la circulación sistémica llegan compuestos procedentes del intestino como el amoniaco.
Al desviarse por el SPSC y no pasar por el hígado donde normalmente se eliminan o transforman que intervienen en la aparición de los síntomas neurológicos de un cuadro de encefalopatía hepática.9
El hígado de un perro es un sistema multitarea que metaboliza la grasa, las proteínas y los carbohidratos, en el cuerpo desempeñan un papel importante en la coagulación de la sangre; la toxina de filtrado y eliminación de residuos.
 Las tiendas de vitaminas liposolubles A, D, E, y K y segrega bilis que es vital para el metabolismo de las grasas.
      Por lo tanto si el hígado se estropea, el cuerpo del perro no puede desintoxicar los residuos metabólicos  y los diferentes productos.
El hígado segrega enzimas específicas para realizar estas tareas y uno de los determinantes principales de la función hepática es la medición de los niveles sistémicos de estas enzimas.10

3.10  ENZIMOLOGÍA

     Al igual que las disciplinas experimentales que han surgido como rama común que es la biología tiene una historia propia construida a través de observaciones experimentales, pruebas y teorías. Se inicio con el estudio de los procesos de fermentación y putrefacción; ANTOINE-LAURENT LAUDISER (1.743-1.794).
fue el primero en plantear sobre bases cuantitativas. El proceso de fermentación alcohólica al observar una relación entre cantidad de azúcar presente y productos formados durante el proceso sostuvo que la fermentación podía ser considerada como una reacción química cualquiera.

No obstante Pasteur demostró pronto que los procesos de putrefacción y fermentación eran provocados por la presencia de baterías y levadura.11

3.10.1 LAS ENZIMAS
La enzima como unidad fundamental de la vida:
Cada célula y cada tejido tienen su actividad propia, lo que comporta continuos cambios en su estado bioquímico en la base de la cual están las enzimas que tienen el poder de catalizar, facilitar y agilizar determinados procesos sintéticos y analíticos. Los propios genes son reguladores de la producción de las enzimas; por tanto genes y enzimas pueden ser considerados como las unidades fundamentales de la vida.
La vida es en síntesis una cadena de procesos enzimáticos desde aquellos que tienen por sustratos los materiales más simples como el agua y el anhídrido carbónico, presentes en los vegetales para la formación de hidratos de carbono hasta los más complicados que utilizan sustratos muy complejos.11

3.10.2 NATURALEZA DE LAS ENZIMAS.

      La palabra enzima se deriva del griego y significa: en la levadura; se usó por primera vez en 1.878 por Kuhne y no fue hasta 1.960 cuando se hizo la descripción de las enzimas en términos químicos.12

3.10.3 COMPOSICIÓN QUÍMICA DE LAS ENZIMAS.

Los conocimientos sobre las composición química de las enzimas constituyeron materia de numerosas controversias hasta 1.926, cuando J.B Sumner (1.887.1.955).
Consiguió cristalizar la ureasa enzima que transformó la urea en anhídrido carbónico y amoniaco y demostrar que era una sustancia proteica.
A partir de entonces fueron aisladas otras enzimas en forma pura, cristalina y el análisis demostraba  siempre la presencia de una proteína simple o conjugada.
 Cuando los análisis químicos demuestran que la enzima es una proteína conjugada pueden distinguirse en el, dos partes bien diferenciadas:


  • El grupo prosteico  (coenzima)
  • La proteína (apoenzima)
El grupo prosteico (coenzima) y el grupo proteico (apoenzimas) han de estar íntimamente ligados entre sí para ser operativos.11

3.10.4  NOMENCLATURA Y CLASIFICACIÓN DE LAS ENZIMAS.

La  unión internacional de bioquímica (IUB) adoptó en 1.964, un sistema complejo pero inequívoco de la nomenclatura enzimática basado en el mecanismo de reacción.
El sistema se basa en la reacción química catalizada que es la propiedad específica que caracteriza a cada enzima, las cuales se agrupan en clases porque catalizan procesos semejantes; y en subclases porque especifican con mayor exactitud, la reacción particular considerada en general las enzimas reciben un nombre de acuerdo con el sustrato o los sustratos que participan en la reacción seguido por el tipo de reacción catalizada y por fin la terminación asa.
Las enzimas fueron clasificadas en seis grupos principales correspondientes por sus términos a las reacciones que cada enzima ejerce sobre el sustrato; estos grupos se subdividen en otros según el tipo de sustrato y los átomos concretos que son sensibles a sus acciones.

Estos seis grupos son:

     1. Oxidoreductasa
     2. Transferasas
     3. Hidrolasas
     4. Isomerasas
     5. Liasas
     6. Ligasas







      

GRUPO
      
 

ACCIÓN
     


EJEMPLOS
1.OXIDOREDUCTASAS
Catalizan reacciones de oxido reducción tras la acción catalítica quedan modificados en su grado de oxidación por lo que debe ser transformado antes de volver a actuar
DEHIDROGENASAS
AMINOKIDASA
DEAMINASAS
CATALASAS
2.TRANSFERASAS
Transfieren grupos activos a otras sustancias receptoras suelen a actuar en procesos de interconversiones de azúcares de aminoácidos, etc.
TRANSALDOLASAS
TRANCETOLASAS
TRANSAMINASAS

3.  HIDROLASAS
Verifican reacciones de hidrólisis con la consiguiente obtención de monómeros a partir de polímeros, suelen ser de tipo digestivo, por lo que normalmente actúan en primer lugar.
GLUCOSIDASAS
LIPASAS
PEPTIDASAS
ESTERASAS
FOSFATASAS
4.  ISOMERASA
Actúan sobre determinada moléculas obteniendo de ellas sus isómeros de función o de posición suelen actuar en procesos de interconversión.
ISOMERASAS DE AZUCAR.
EPIMERASAS
MUTASAS

5.  LIASAS
Realizan la degradación o síntesis de los enlaces fuertes sin ir acoplados a sustancia de alto valor energético.
ALDOLASAS
DECARBOXILASAS
6.  LIGASAS
Realizan la degradación de síntesis de los enlaces fuertes mediante el acoplamiento a sustancias ricas en energía como los nucleósidos del ATP
CARBOXILASAS


PEPTOSINTETASAS




 3.10.5  PARTES  DEL SISTEMA ENZIMÁTICO

     Los sistemas enzimáticos están formados por la enzima propiamente dicha (apoenzimas) y el sustrato o los sustratos (coenzimas) y sustancias activadoras. La estructura formada por  la apoenzima y la coenzima se denomina halo enzima con cierta frecuencia se reconocen sistemas enzimáticos que no tienen grupo prostético o activadores reconocidos.
Ø  ACTIVADORES
Las enzimas son catalizadores orgánicos que disminuyen la denominada energía de activación y por tanto facilitan el que se inicie una reacción. Este proceso implica el trabajo necesario para poner a dos moléculas en un contacto lo suficientemente estrecho como para que reaccionen, además el trabajo debe realizarse sobre la unión química una son valencia en sentido estricto para que pueda romperse y formar otros compuestos. Las enzimas como muchos catalizadores son partículas de gran superficie y muestran que tienen capacidad para atraer y captar diversas moléculas.
Cualquier que permita por una parte atraer al sustrato a su centro activo se puede considerar como un activador, además algo que permita la rápida salida de los productos también puede considerarse como un activador.
Así se reconocen distintas posibilidades:
Ø  Activación iónica: K, Mn, Mg1Ca, Fe, Cu, etc.
Ø  Activación de la apoenzima
Ø  Integridad de los grupos funcionales del centro activo.

3.10.6 LAS ENZIMAS SON CATALIZADORES ESTEREOESPECÍFICOS.

      Casi todos los sustratos forman por lo menos 3 enlaces con las enzimas, esta adherencia en tres puntos puede conferir asimetría a una molécula por otro lado asimétrica.

3.10.7 ESPECIFICIDAD ENZIMÁTICA.




Los distintos grupos de enzimas muestran variaciones considerables en su grado de especificidad. Algunas de ellas muestran requerimientos estrictos, tanto para el sustrato como para el tipo de unión química sobre el que van a actuar, pequeños cambios en cualquiera de ellos, bastan para iniciar la reacción, tal es el caso de la mayoría de las enzimas.
El requisito de estereoespecificidad para los sustratos  es muy importante, las enzimas que habitualmente atacan a los azúcares naturales con configuración D, no lo hacen sobres sobre sus isómeros artificiales L.
Cuando el sustrato es simétrico y el producto es asimétrico, la enzima provoca específicamente la formación de uno solo de los productos asimétricos, aquel `para que la enzima es activa.
Tal es el caso de la deshidrogenasa láctica, que al actuar sobre el ácido pirúbico (simétrico), produce exclusivamente ácido D-láctico y no ácido L-láctico.

3.10.8     CONCEPTO Y PROPIEDADES DE LAS ENZIMAS.
Las enzimas son partículas de naturaleza proteica que catalizan las reacciones bioquímicas siempre que sean termodinámicamente posible.
Son susceptibles a las mismas condiciones que desnaturalizan las proteínas tales como: calor, ácidos fuertes, bases fuertes, metales pesados y detergentes.
Las enzimas dan positivo a todas las pruebas calorimétricas para proteínas tales como la reacciones de Biuret (enlaces peptídicos).12
Las enzimas tienen:
Ø  Alta eficacia catalítica
Ø  Velocidad de reacción alta
Ø  Condiciones de reacción moderada
Ø  Especificidad de reacción
Ø  Capacidad de regulación
Las enzimas son indispensables en el diagnóstico clínico porque la alteración de la actividad enzimática puede estar asociada a un estado patológico.13

3.10.9 USO DE LAS ENZIMAS EN EL DIAGNÓSTICO CLÍNICO.



Ø  DETERMINACIÓN DE ACTIVIDAD ENZIMATICA: es la velocidad a la cual las enzimas catalizan las reacciones (U/ml)
Ø  ANÁLISIS CLÍNICO: determinación de la actividad enzimática en sangre.
Ø  AUMENTO:
Daño tisular por necrosis del tejido o aumento de la permeabilidad
Inducción enzimática
Descenso del catabolismo
Ø  DISMINUCIÓN:
Deficiencia en el tejido, descenso de síntesis o aumento de degradación.
Falta de factores o de coenzimas
Inactividad enzimática

3.11  VARIABLES QUE AFECTAN EL ANALÍSIS CLÍNICO

PREANALÍTICAS:
Ø  Biológicas (pacientes)
         -    Inherentes no controlables pero a tener en cuenta
         -    Controlables
         -    patológicas
Ø  No biológicas (muestras)
-          Toma de la muestra
-          Manipulación de la muestra

ANALÍTICAS:
Ø  Interferencias
-          Lipemia
-          Hemólisis
-          Ictericia
-          Hiperproteinemia
-          Fármacos (iatrogenia)
-          Anticoagulantes

3.11.1 VARIABILIDAD METEREOLÓGICA
-          Medidas y errores
-          Control de calidad externo e interno.

                           FASES DEL PROCESO ANALÍTICO

FASE PREANALÍTICA          FASE ANALÍTICA             FASE POSANALÍTICA
        CLÍNICO                                                                     INTERPRETACIÓN DEL  
                                                                                                           INFORME
 


Solicitud de análisis                                                                      emisión del informe
 


     Extracción                                                                            elaboración del informe
 


Preprogresamiento de la muestra                                              obtención del resultado

                                                               Análisis
                                           
3.12 ISOENZIMAS O ISOZIMAS

    Son distintas formas moleculares de una enzima que catalizan una misma reacción.

3.12.1 ENZIMAS UTILIZADAS EN EL DIAGNÓSTICO CLINICO

Ø  Alanino amino transferasa (ALT)
Ø  Aspartato amino transferasa (AST)
Ø  Creatina quinasa  (CK)
Ø  Fosfatasa alcalina (AP; ALT; SAP)
Ø  Gamaglutamil transferasa (GGT)
Ø  Amilasas
Ø  Lipasa

3.12.2 ALANINO AMINO TRANSFERASA (ALT)
            También llamada GPT (Transaminasa glutamicopirúbica)

Ø  FUNCIÓN
              cataliza la transferencia del grupo α-amino de la alanina al ácido α –zeto glutárico formando ácido pirúbico y glutámico.

Ø  LOCALIZACIÓN 
             Citoplasma.

Ø  VIDA MEDIA:
             2-5 días en los perros

Ø  UTILIDAD DE DIAGNÓSTICO:
indicador específico de patologías hepáticas en pequeños animales      perros     y gatos), grandes animales (cerdos y caballos).

Ø  ESPECIFICIDAD DE TEJIDO:
              Hígado, músculo (cardiaco y esquelético), riñones y eritrocitos.

    CAUSAS DEL INCREMENTO DE ALT
Ø  Fármacos (paracetamol, codeína, anticonceptivos orales)
Ø  Patologías principalmente hepáticas y también musculares.
Ø  Hemólisis.

3.12.3 ASPARTATOAMINOTRANSFERASA. (AST)
También conocida como GOT (transaminasa glutámico oxalacética)
FUNCIÓN: cataliza la transferencia del grupo α-amino del acido aspártico al ácido α zetoglutárico, formando ácido oxalacético y glutámico.

Ø  LOCALIZACIÓN: Citoplasma y mitocondria
Ø  VIDA MEDIA: De cinco a doce horas
Ø  UTILIDAD DIAGNÓSTICA: indicador de patologías hepáticas y-o musculares   en grandes y pequeños animales.
Ø  ESPECIFICIDAD DE TEJIDO: Músculo esquelético, hígado, músculo cardiaco, eritrocitos, células epiteliales renales y tejido cerebral.
Ø  CAUSAS DEL INCREMENTO DE AST.
Ø  Fármacos (aspirina, medicamentos antihipertensivos)
Ø  Efectos fisiológicos
Ø  Patologías hepática,  cardiomiopatías (infarto agudo del miocardio)
Ø  Hemólisis

3.12.4  CREATINA QUINASA (ck)
Función: importante para la contracción muscular. Transfiere el fosfato de la fosfocreatina al ADP formando ATP.
Ø  LOCALIZACIÓN: citoplasma y mitocondrias de miocitos
Ø  VIDA MEDIA: muy corta una hora en caballos.
Ø  UTILIZACIÓN DIAGNÓSTICA: enfermedades neuromusculares.
Ø  ISOENZIMAS: CK-1 cerebro
                         CK-2 músculo cardiaco y esquelético
                         CK-3 músculo esquelético y cardiaco
                         CK-MT         membranas mitocondriales y músculo cardiaco.
Ø  CAUSAS DE INCREMENTO DE CK.
Ø  Patologías musculares(infarto al miocardio, rabdomiólisis)
Ø  Fisiológicas, evitar ejercicios físicos antes de la obtención de sangre.

3.12.5  FOSFATASA ALCALINA (AP, ALP, SAP).
Función: metaloenzima que cataliza la hidrólisis de diferentes éteres de fosfatos. Requiere ph alcalino y cofactores (iones zinc y magnesio).
Ø  LOCALIZACIÓN:
 asociadas a membranas.
Ø  UTILIDAD DIAGNÓSTICA:
indicador de colestasis (perro), indicador especifico de enfermedad hepática, no específico para animales grandes.

3.12.6  ISOENZIMA:
                            Intestinal (IAP)
                            Corticosteroides (CAP)
                            Ósea (BAP)
                                   Hepática (LAP)
Ø  VIDA MEDIA: depende de la especie y el isoenzima.
                                    LAP-perro- 66 horas
                              CAP-perro- 70 horas
                              PLACENTAL, RENAL, E INTESTINAL: perro- 6 minutos.
Ø  CAUSAS DEL INCREMENTO DE ALP:
                       Edad
Ø  PATOLOGÍAS:
-          hepático. Biliares
-          hiperadrenocortisismo (enfermedad de cushing)
-          actividad osteoblástica incrementada
Ø  FÁRMACOS:
-           hemólisis
Ø  INTERFERENCIAS:
-          Anticoagulantes (EDTA, CITRATO, OXALATO)

3.12.7 GAMAGLUTAMIL TRANSFERASA (GGT)

Ø  FUNCIÓN:
Cataliza la transferencia de grupos glutamil C-terminales de unos péptidos a otros o aminoácidos, es importante en el metabolismo del glutateón, la absorción de aminoácidos en la anti-oxidación.
Ø  LOCALIZACIÓN:
 Membrana y citoplasma
Ø  VIDA MEDIA:
96 HORAS
Ø  UTILIDAD DIAGNÓSTICA:
 Es un indicador muy sensible  de colestasis.
Ø  ESPECIFICIDAD DE TEJIDO: 
                                           Hepático - biliar
                                           Páncreas – tracto gastrointestinal
                                           Renal


3.12.7.1 CAUSAS DEL INCREMENTO DE GGT:
Ø  Fármacos (fenobarbital)
Ø  Efectos fisiológicos
Ø  Patología en pequeños animales
- colestasis
- hepáticas
Ø  Patología en animales grandes
-          Hepatobiliares

3.12.8 AMILASA (α- amilasa )

Ø  FUNCIÓN:
hidroliza carbohidratos complejos para formar maltosa y glucosa
Ø  LOCALIZACIÓN:
Se produce en páncreas, hígado e intestino delgado, se filtra y reabsorbe a través del riñón.
Ø  UTILIDAD DIAGNÓSTICA:
 Indicador de pancreatitis, fallo renal y obstrucción intestinal.
Ø  ESPECIFICIDAD DE TEJIDO
-          PÁNCREAS: gránulos de cimógeno
-          INTESTINO: duodeno
-          HIGADO
-          GLÁNDULAS SALIVALES
-           
3.12.8.1 CAUSA DEL INCREMENTO DE LA AMILASA

Ø  PATOLOGÍAS:
-          Pancreáticas
-          Insuficiencia renal
-          Obstrucción intestinal

Ø  INTERFERENCIAS:
-          Anticoagulantes ( EDTA, CITRATO, OXALATO )

3.12.9 LIPASAS

FUNCIÓN: Hidroliza triglicéridos
LOCALIZACIÓN: Sintetizada en el páncreas y en la mucosa gástrica se elimina a través del riñón.
UTILIDAD DIAGNÓSTICA: indicador de enfermedades pancreáticas.
FORMAS:
Pancreática
Gástrica: colipasa
Lipoproteína lipasa (endotelio vascular)
Hepática
Los valores de referencia varían según especie y método de determinación.13
Referencia en perros.
             ALT
              20-100  
                 U/L
             AST
              23-66
                 U/L
             ALP
              20-150
                 U/L
             GGT
                1-6
                 U/L
         AMILASA
           500-1500
                 U/L
           LIPASA
              13-200
                 U/L
             CK
              10-150
                 U/L



             ALT
            10-84
                 U/L
             AST
             9-48
                 U/L
             ALP
           20-200
                 U/L
             GGT
             1-10
                 U/L
         AMILASA
         200-1290
                 U/L
           LIPASA
          200-700
                 U/L
             CK
           20-200
                 U/L


3.13 ENZIMOLOGÍA CLÍNICA

Las células de distintos órganos corporales contienen una serie de enzimas que les permite realizar funciones específicas. Algunas enzimas están ampliamente distribuidas, otras sólo se hallan en elevadas concentraciones en las células de un número limitados de órganos, algunas veces solamente en uno.
Una pequeña cantidad de todas estas enzimas están presente en el plasma, tras su liberación de las células, ya sea porque la enzima es excretada o por que las células están siendo repuestas.
Cuando el nivel plasmático de una enzima es significativamente superior al normal, es que hay un desorden en el órgano u órganos que lo contienen, y en el cual se confina normalmente. Esto puede implicar la destrucción (necrosis), de un número sustancial de células; lo que supone la liberación de la enzima, o un daño subletal que incrementa la permeabilidad de la membrana celular permitiendo que salgan las enzimas.
A veces las células pueden haber sido inducidas a sintetizar más enzimas de lo normal. A menudo aunque no siempre esto sucede por efecto de un fármaco, y recibe el nombre de inducción enzimática.
Un incremento en la cantidad de una enzima es el cambio más habitual, pero a veces una deficiencia de células en un órgano provoca una disminución del nivel enzimático en el plasma.14

3.13.1 UNIDADES DE MEDIDA.

Los niveles enzimáticos difieren de otras sustancias, en que no se miden en términos de concentración molar o concentración de masa, sino cantidad de acción enzimática en un volumen dado (1 litro) de plasma o (suero).
En esencia lo que se mide es la proporción de una sustancia (sustrato) que es convertida en otra por medio de la enzima.
La actividad se expresa en unidades internacionales (de actividad enzimática) por litro es decir, U/L.
Sin embargo la definición de unidad internacional  es algo holgada; es la cantidad de enzima que transforma un micromol de sustrato en un minuto. Si se cambia el sustrato usado en el metro, la temperatura de incubación, o el tampón, también cambia el resultado numérico. Así lo que parece un modelo de hierro (U/L) resulta que varía dependiendo de cómo se realiza la estimación. Para algunas enzimas por ejemplo la fosfatasa alcalina, existen muchos métodos y los resultados obtenidos con ellos varían considerablemente (con un factor de 5 o más).

3.13.2  INTERFERENCIA.

En todas las estimaciones espectrofotométricas, la presentación de una fuerte coloración (por ejm de vida a hemólisis o a ictericia) o de turbidez (debido a lipemia) en la muestra es indeseable, ya que puede reducir la transmisión de luz y producir valores erróneamente elevados.
Dependiendo del método pero en las estimaciones enzimáticas la hemólisis es particularmente indeseable. Porque algunas enzimas están presentes en concentraciones elevadas (por ejm la AST Aspartatoaminotransferasa, y la lactatodeshidrogenasa (LDH) y su liberación causa valores erróneamente altos por otro lado la actividad de la lipasa está severamente inhibida por la presencia de hemoglobina. Un buen laboratorio informará al clínico sobre la presencia de hemólisis o de otras características que se deben tener en cuenta para  interpretar los resultados.14

3.13.3 ESPECIFICIDAD.

Algunas enzimas son esencialmente órgano-específicas es decir (están presentes en concentraciones elevadas sólo en un órgano) ejm la alaninaminotransferasa y la orninitinacarbamiltransferasa (oct ) en el hígado, y la lipasa en el páncreas, así cuando hay una actividad elevada en el plasma, no hay duda de donde procede la enzima. Pero algunas enzimas están presente en varios órganos, y entonces su procedencia es incierta.

.         TRES FACTORES PUEDEN SER ÚTILES PARA DECIDIR SU LU-
              GAR DE ORIGEN.           

1.      La presencia de signos clínicos y de otros hallazgos de laboratorio sugieren la implicación de un órgano en particular.
2.      Estimar la actividad de otras enzimas, los órganos en los que hay distintas enzimas y las concentraciones de enzimas en esos órganos, varían considerablemente. Así pues si se examinan una combinación de enzimas es más probable que el órgano en cuestión sea correctamente identificado.
3.      Determinar la actividad de una isoenzima en particular, algunas enzimas tienen formas moleculares ligeramente diferentes, aunque todas tienen exactamente los mismos efectos enzimáticos que reciben el nombre de isoenzimas. En algunos casos todas las variantes de la enzima están presentes en cada uno de los órganos (por ejm AST). Pero en el caso de otras enzimas, cada isoenzima aparece en un lugar diferente, o las isoenzimas que pueden estar en diferentes combinaciones, en distintos lugares; por consiguiente determinar la actividad de cada isoenzima en formas separadas puede establecer el origen de la enzima.

3.14.  ALANINO AMINO TRANSFERASA (ALT)

También es conocida como alanina amino transferasa sérica (SALT) anteriormente era reconocida como glutámico pirúbico transaminasa (GPT), o glutámico pirúbico transaminasa sérica (SGPT).

Ø   INTERVALO NORMAL DE REFERENCIA.
Depende por completo del método utilizado.
Esta enzima es esencialmente específica del hígado en perros y gatos, y su incremento indica un daño de los hepatocitos que provoca la liberación de las enzimas.
Es la mejor prueba de las disponibles rutinariamente para detectar un daño hepático. No es test de función hepática, no tiene isoenzima específicas; la concentración de alt en el corazón y en el riñón son de un cuarto y un décimo de la concentración hepática respectivamente.
Una actividad baja no tiene significado conocido, el grado de daño hepático que causa un incremento de la actividad de la alt, puede ir de uno leve reversible (daño celular subletal), suficiente para permitir la salida de enzimas a través de la membrana celular, pero que no tiene un efecto apreciable sobre las funciones celulares (como en el caso de la hipoxia debido al shock). A la necrosis celular con pérdida total de funcionalidad (como la causada por la hepatitis infecciosa canina). El incremento de la actividad es aproximadamente proporcional al número de células dañadas y no al grado de lesión.
Ligeros aumentos de la actividad de la ALT son poco importante, ya que una de las funciones del hígado es la destoxificación, no es infrecuente que sufra un ligero grado de lesión.
Un daño menos extenso producido por hepatotoxinas produce una elevación más temprana y el retorno al nivel normal es más rápido.
Un daño persistente provoca una elevación persistente de la actividad plasmática, como ocurre en la neoplasia primaria y en una hepatitis activa crónica.

3.14.1 CAUSAS DEL INCREMENTO DE LA ACTIVIDAD DE LA ALT.
Daño hepático (daño hepatocelular).
La magnitud del aumento no se correlaciona con la capacidad del hígado para recuperarse del daño o para funcionar normalmente; sin embargo refleja el número de hepatocitos implicados en un proceso agudo.
La presencia de una actividad elevada indica la persistencia de la causa. Desde luego el valor obtenido de una única muestra, no es necesariamente el valor máximo. Las muestras pueden haber sido extraídas cuando la actividad aún está aumentando o bien están disminuyendo.
Aumento significativo en la actividad de la ALT se deben a procesos inflamatorios o a neoplasias primarias; las pruebas de laboratorio pueden proporcionar información sobre tres aspectos de las enfermedades hepáticas.
1.                  Si han sido dañadas las células hepáticas (daño hepatocelular).
2.                  Si existe obstrucción del flujo biliar (colestasis)
3.                  Si la función hepática está alterada.
Obviamente estos tres procesos están interrelacionados, pero una lesión no tiene necesariamente como resultado una pérdida de función.14
La disminución a partir de un nivel de actividad elevado previo, puede ser debido a una deplesión de la enzima y/o a una reducción del número de células más que a una recuperación.  La actividad  de la ALT no se correlaciona con la función hepática. Indica el número de células afectadas por el daño hepático ya sea grave e irreversible o leve y reversible en cualquier momento.

Ø  HEPATITS INFECCIOSA AGUDA.

HEPATITIS INFECCIOSA CANINA: esta enfermedad en los perros y la encefalitis enzoótica en los zorros son causadas por el mismo virus. El virus penetra en el cuerpo a través del tracto digestivo, y posee una selectividad por las células endoteleliales y hepática; el período de incubación varía de unas cuantas horas cuando el virus es ingerido, hasta seis a nueve días cuando el perro se pone en contacto con otros, más del setenta y cinco a noventa por ciento de casos se recuperaran dentro de las dos semanas.15
La actividad de la ALT está especialmente incrementada en la hepatitis infecciosa canina y en la leptospirosis. Cuando hay necrosis la actividad puede incrementarse hasta treinta veces el límite superior normal.
A pesar de la recuperación puede que los valores no vuelvan a la normalidad durante dos o tres semanas.14

Ø   HEPATITIS TÓXICA.
Se refiere a la hepatitis producida por los fármacos, compuestos químicos y toxinas  biológicas (por ejm: aflatoxinas bacterianas liberadas en una piometra ejemplo de fármacos que pueden  causarla son: paracetamol, glucocorticoides, fenitoina, fenobarbital, primidona y mebendazol.
Los fármacos y los productos bioquímicos pueden elevar la actividad de la ALT por dos mecanismos biológicos: toxicidad e inducción enzimática y puede ser difícil establecer una clara división entre ellos.
En general, la toxicidad causa un menor incremento de la ALT que la necrosis hepática aguda debido a una infección y a condición de que la causa no persista, los valores vuelven a la normalidad más pronto.14

Ø    HEPATITIS ACTIVA CRÓNICA.
Las causas son:
Desórdenes autoinmunes, problemas de almacenamiento de cobre y causas ideopáticas.
Se caracteriza por una actividad de ALT persistentemente elevada, del orden de doce veces del límite superior normal.
TRAUMA HEPÁTICO GRAVE
Ocurre por ejemplo en accidentes de tránsito o en hernias diafragmáticas.
PANCREATITIS AGUDA.
Las toxinas procedentes del páncreas son llevadas al hígado a través de la vena porta.
SHOCK GRAVE.
La hipoxia resultante puede afectar a muchas células incrementando marcadamente la actividad de la ALT como ocurre en cualquier otro daño hepatocelular difuso.
NEOPLASIA.
Ø  Neoplasia primaria como por ejemplo carcinoma, hepatoma (y también hiperplasia modular), la actividad de      la        ALT puede ser diez veces superior al límite superior normal (o más), y esta elevación permanece bastante constante.
Ø  Neoplasias metastásicas.
Un incremento de la actividad de la ALT es un hecho poco frecuente.
AMILOIDOSIS HEPÁTICA
Provoca destrucción masiva de las células con aumento moderado de la actividad de la ALT.
PROCESO HEPÁTICO SECUNDARIO
Un incremento de leve (es decir dos a tres veces el límite superior normal), a moderado en la actividad de ALT, está asociado a muchos desórdenes endócrinos las causas pueden ser:

Ø  HEPATOPATÍAS POR ESTEROIDES: (hepatomegalia y ocasionalmente necrosis) en estos casos de híper adrenocorticismo (síndrome de cusching) y de  administración de glucorticoides; hay cierto grado de inducción enzimática.
Ø  LIPIDOSIS HEPÁTICA: en casos de hipotiroidismo en (aunque aparece de forma inconstante), acromegalia y diabetes mellitus en perros y gatos (especialmente diabetes mellitus por cetoácidos en los que la hipoxia y la pancreatitis pueden ser en parte los responsables).
Ø  HIPOXIA: presente en el setenta y cinco por ciento en los casos de hipotiroidismo en gatos (y un tercio de los casos en tumores tiroideos en perros) e isquemia en caso de hipertiroidismo primario.
También aumenta la ALT en casos de hiperinsulinismo, feocromositomas y síndromes de Zollinger Ellison.

SHUNT PORTOSISTÉMICO.
Existe un aumento leve de la actividad de la ALT.

OTRAS CAUSAS NO INFLAMATORIAS.
Otros procesos además de neoplasias y procesos hepáticos secundarios a endocrinopatías, rara vez producen variaciones en la actividad de la ALT por ejemplo cirrosis, congestión pasiva crónica.

La obstrucción biliar sólo provoca aumento de la actividad de la ALT, cuando hay asociada una inflamación hepática.

INDUCCIÓN POR FÁRMACOS

Los fármacos pueden inducir más que provocar su liberación a causa de su toxicidad por ejemplo: anticonvulsivantes (primidona y fenitiona) glucocorticoides, mebendazol y tiacetersamida.
Sin embargo puede ser difícil distinguir el efecto de la inducción y el de la toxicidad respectivamente, en el aumento de la actividad de la ALT.
Ø  MIOCARDITIS
La miocarditis causa un aumento ligero o moderado de la ALT (aunque el músculo cardiaco sólo tiene el 25% de la concentración de la ALT del hígado)
FIEBRE (efecto leve).
Una ligera elevación de la actividad de la ALT se ha descrito en condiciones de fiebre alta.

 3.15.   ASPARTATO AMINO TRANSFERASA (AST) 

También llamada aspartato amino transferasa sérica (SAST) anteriormente conocida como glutámico oxalacético transaminasa  (GOT) o glutamico oxalacético transaminasa sérica (SGOT).
Es una enzima que se encuentra en altas cantidades en células del miocardio, también se encuentran en menores cantidades en otros tejidos como el hígado y los músculos.16
La AST (aspartato amino transferasa) es una enzima muy sensible pero muy poco específica a la hora de determinar funciones hepáticas, su sensibilidad es alta debido a que es una enzima que se localiza en el citosol y las mitocondrias de las células por lo que una elevación puede indicar una lisis completa del hepatocito, las elevaciones de AST suelen ir asociadas a la de ALT en alteraciones de hígado en el gato, es un parámetro bastante fiable a la hora de determinar problemas hepáticos.
Sin embargo no es un marcador hepático muy específico ya que se encuentra en considerables cantidades en el músculo estriado y cardiaco también se eleva con corticosteroides y fenobarbital.17

3.15.1 INTERVALO NORMAL DE TRANSFERENCIA.

Depende totalmente del método utilizado, la AST aparece en una amplia variedad de tejidos pero con una mayor concentración en el músculo cardiaco, músculo esquelético, y en el hígado.
La principal aplicación de esta determinación está en el diagnóstico de desórdenes musculares.
En el diagnóstico de un proceso hepático la ALT es más importante porque virtualmente es específica del hígado. el daño en las células de cualquiera de los órganos anteriores causa la liberación de dos isoenzimas, que incrementan su actividad plasmática. Es decir los aumentos en la actividad de la AST se atribuye a daño hepático, daño al miocardio y/o daño al músculo esquelético. Una actividad de AST baja no tiene ningún significado particular.

3.15.2 CAUSAS DE INCREMENTO DE LA ACTIVIDAD PLASMÁTICA DE LA AST.
Ø  Daño hepático
Ø  Daño en el músculo esquelético
Ø  Desórdenes miocárdicos
Ø  Ejercicio intenso

Ø  Error: hemólisis
El mayor problema de la AST es su falta de especificidad y por ello, cuando sea posible se deben realizar otras determinaciones enzimáticas y/o otras pruebas para confirmar el diagnóstico presuntivo.

 DAÑO HEPÁTICO.

Todos aquellos desórdenes hepáticos que provocan un incremento en la actividad plasmática de la ALT, también elevan la actividad de la AST. Aunque la magnitud del aumento es a menudo menor; también algunos fármacos por ejemplo (anticonvulsionamente y estrógenos), pueden inducir la actividad de la AST e incluso incrementarla por un mecanismo de toxicidad.

Ø  DESÓRDENES MUSCULARES.

Todos los desórdenes musculares los que pueden clasificarse en: inflamatorios, traumáticos, hereditarios, endócrinos, metabólicos nutricionales, Miastemia gravis, neoplasias, mioglobinuria, hipercalcemia.
La AST y la LDH dan lugar a picos menores que la CK pero persisten durante más tiempo.
La AST alcanza el valor máximo después de 12-24 horas y su actividad dura de 5 a 6 días.

Ø  DAÑO DEL MÚSCULO CARDIACO

Las cardiopatías que producen incrementos en la actividad de la AST son:
Ø  En particular aquellas que causan isquemia por ejemplo: endocarditis bacterianas, trombosis aórtica, infartos miocárdicos y dirofilariosis.
Ø  Traumatismos, necrosis, degeneraciones o neoplasias que impliquen al músculo cardiaco (aunque causan un menor incremento en la actividad).

Ø  DAÑO EN EL MUSCULO ESQUELÉTICO

Todos los desórdenes musculares que producen el incremento de la CK también  elevan la actividad de la AST aunque el aumento suele ser menor que en la actividad de la CK  y más  lento normalmente el pico de actividad aparece después de las 24 horas  la actividad dura 5-6 días.

Ø  DESÓRDENES MIOCÁRDICOS

Isquemia cardiaca
La mayoría de procesos cardiacos no implican daño miocárdicos, pero elevados niveles de actividad de el asta han sido descritos en casos de isquemia cardiaca debida a:

Ø  Endocarditis bacteriano
Ø  Dirofilariosis canina
Ø  Trombosis aórtica
Ø  Infarto miocárdico

Ø  OTRAS CARDIOPATÍAS

Se han hallado niveles más bajos de actividad en las cardiopatías debidas a traumatismos necrósis, degeneración o neoplasia.

Ø  CONGESTIÓN CARDIACA.
Cuando hay congestión cardiaca, la mayor concentración a la actividad de la AST total proviene del hígado congestivo.

Ø  EJERCICIO INTENSO
En los galgos se duplica la actividad de la AST inmediatamente después de la carrera.
Ø  ARTEFACTOS: HEMÓLISIS
En los eritrocitos hay una concentración significativa de AST, por ello cuando se produce hemólisis se libera y aumenta la actividad de la AST en el plasma.

 3.16 FOSFATASA ALCALINA

La fosfatasa alcalina del enlace esterfosfórico entre un grupo orgánico y un grupo fosfórico a PH alcalino lo que libera fosfato al medio.
La fosfatasa alcalina (ortofosfóricomonoéster, fosfohidrolasa) es una enzima ampliamente distribuida que hidroliza el enlace éster fosfórico entre un grupo fosfato y un radical orgánico a ph básico (ph óptimo entre 9 y 10), liberando fosfato inorgánico. Está presente en riñón, hígado, intestino y hueso.
La medida de niveles anormales de fosfatasa alcalina en el suero, indican la existencia de enfermedades óseas degenerativas (raquitismo, osteomalasia, hipertiroidismo secundario, osteosarcoma), o bien daños hepáticos.
El aumento fisiológico de los niveles plasmáticos de fosfatasa alcalina se produce en animales en fase de crecimiento (se está formando tejido óseo), o en hembras gestantes (fosfatasa alcalina de la placenta).
Esta enzima también se utiliza como control de la adecuada pasteurización de la leche y crema, dado que la fosfatasa alcalina se inactiva por calentamiento.18
El propósito de la prueba A: diagnóstico de enfermedades óseas en las cuales la actividad de las células óseas disminuye o aumenta; también se utilizan en el diagnóstico de afecciones hepáticas tales como ictericia obstructiva.19

3.16.1 INTERVALO NORMAL DE REFERENCIA.

Depende por completo del método que se utilize, por consiguiente para interpretar un valor enzimático de un laboratorio concreto, es necesario conocer el intervalo normal de referencia de laboratorio para el método utilizado, y desde luego para las especies en cuestión. Los valores normales en el gato son alrededor de un tercio de los del perro.
La fosfatasa alcalina está constituida a un grupo de isoenzimas producidas por células de varios órganos: hígado (células epiteliales del conducto biliar y hepatocitos), hueso (osteoblastos), intestino, riñón y placenta, el incremento en la actividad plasmática se debe a la isoenzima que deriva del hígado  y del hueso,      las
otras  tienen una vida media de sólo tres a seis minutos y por lo tanto contribuyen poco a la actividad total.



A diferencia de muchas otras enzimas el incremento de la actividad plasmática de la ALP se debe más a la inducción (es decir aumento de la síntesis), que al aumento de la liberación a partir de las células dañada.
Posiblemente sólo la ALP acabada de sintetizar puede salir de la célula. En el perro hay dos isoenzima que derivan del hígado, una de ellas es inducida específicamente por esteroides y por ello se denomina “ALP  inducida por esteroides” (SIAP). Sin embargo esta isoenzima está ausente en el gato.
Para el diagnóstico es útil conocer el origen del aumento de la actividad de la ALP.
Hay técnicas disponibles para separar la isoenzima y determinar su actividad de forma individual, por ejemplo la electro foresis, métodos inmunológicos y métodos cromatro gráficos.
La colestasis (obstrucción del flujo biliar) en particular induce la ALP hepática. El aumento de la actividad de la ALP es el indicador de colestasis más sensibles porque se produce antes de que el aumento de los niveles plasmáticos de bilirrubina sean detectables. Probablemente los ácidos biliares estimulan la síntesis de ALP.
El aumento de la actividad de la ALP hepática también se ha observado en caso de necrosis hepática y de inflamación, y también es inducido por fármacos como los barbitúricos y los anticonvulsinantes.
En el perro la vida media de esta isoenzima es de tres días. La isoenzima ósea es inducida por la actividad osteoblástica y por ello la actividad de la ALP es mayor en animales jóvenes en incremento, y en aquellos desórdenes en lo que tiene lugar un crecimiento o remodelación del hueso.
En perros y gatos de menos de seis meses de edad, la actividad de la ALP puede ser hasta seis veces mayor que el límite superior normal de los adultos.
El aumento de la actividad de la ALP, esta principalmente asociado a la destrucción biliar y/o daño hepático, efectos de los esteroides y otros fármacos, procesos óseos extensos algunas neoplasias y algunas endocrinopatías, sin embargo, también se han observado aumentos en animales “normales”; sobre todo en aquellos  que están en crecimiento, pero también en gatas gestantes y en galgos sometidos a entrenamiento.





3.16.2 CAUSAS DEL INCREMENTO DE LA ACTIVIDAD PLASMÁTICA DE LA ALP.

          Obstrucción biliar (colestasis), intra o extra hepática
          Daño hepático
          Inducción por esteroides
Ø  Hiperadrenocorticismo
Ø  Administración de esteroides
Animales en crecimiento
Enfermedad ósea extensa o generalizada: hiperparatiroidismo otros desórdenes endócrinos.
Neoplasia
Septicemia/endotoxemia
Inducido por fármacos no esteroides
Inanición
Regeneración hepática
Gestación (gata)
Entretamiento (galgos)
Dieta
Los mayores incrementos se hallan en casos de colestasis e inducción por esteroides.

3.16.2.1  OBSTRUCCIÓN BILIAR.

La obstrucción biliar ya sea intra o extra hepática, causa colestasis y puede conducir a una ictericia obstructiva.
El aumento de la actividad está relacionado con el grado de obstrucción completa en el perro y hasta 15 veces el límite superior normal en el gato, las causas son:
Ø  Compresión de los canalículos biliares por parte de los hepatocitos inflamados.
Ø  Compresión de los conductos biliares por parte de lesiones que ocupan espacio, como neoplasias o abcesos (ya sean intrahepáticas o extrahepáticas).



Ø  Acumulación difusa de tejido anormal en el hígado por ejemplo: amiloide, tejido fibroso o tejido neoplásico.
Ø  Lesiones hepáticas pio granulomatosas en infecciones crónicas diseminadas como la histoplasmósis.
Ø  Obstrucción del conducto biliar por parte de piedras en la vesícula biliar o pocas veces por ascáridos en migración.
Ø  Enfermedad quística congénita del árbol biliar

La roptura del conducto biliar también produce un aumento en la actividad de la ALT.

3.16.2.2 DAÑO HEPÁTICO (daño hepato celular)

En general hay un aumento de la actividad de la ALT, AST y GGT, y otros cambios como disminuciones en la albúmina, la urea y posiblemente la glucosa.
El aumento en la actividad de la ALP se explica en parte por la colestasis intra hepática producida por daños a los canalículos  hepáticos, inflamación de los hepatocitos y/o fibrosis. Por consiguiente las lesiones centro lobulillares dan lugar a un aumento menor de la actividad; sin embargo el incremento también puede ser debido a una lipidosis hepática.
El aumento es generalmente hasta seis veces mayor que el límite superior normal.
El daño hepático puede ser debido a:
Ø  Enfermedades infecciosas incluyendo la colangeo hepatitis el aumento de la ALP no es constante.
Ø  Fármacos y compuestos químicos tóxicos y toxinas biológicas los principales responsables son: fósforo, fenol y disolventes orgánicos.
El aumento de la actividad de la ALP puede parecer más tarde que en la ALT y la AST, y puede continuar incrementándose en la recuperación, mientras que la actividad de la ALT y AST disminuyen.
Ø  Hepatitis activa crónica.
Puede aparecer en enfermedades autoinmunes, problemas de almacenamiento de cobre y por causas ideopáticas.

Ø  Traumatismo hepático grave.
La causa más común es el accidente de tráfico.
Ø  Pancreatitis aguda.
Resulta de toxinas provenientes del páncreas transportadas al hígado a través de la vena porta.
Ø  Colangitis linfosítica y lipidosis hepática felina.
Normalmente hay un aumento considerable de la actividad de la ALP en éstos desórdenes felinos.

Ø  Neoplasia
-          Primaria: En los carcinomas aumenta invariablemente. Pero en general menos de 10 veces el límite superior normal.
Aunque en el perro puede llegar a ser excepcionalmente de 50 a 100 veces mayor que el límite superior normal.
-          Metastásica: los incrementos son variables y modestos.
Ø  Cirrosis.
El incremento de la actividad de la ALP se debe a la obstrucción del drenaje biliar.
Ø  Shunts portosistemicos.
En general no producen incremento en la actividad de la ALP y si lo hacen son pocos significativos.

3.16.2.3 INDUCIDO POR ESTEROIDES EN PERROS.

Los valores pueden tardar meses en volver a la normalidad.
Ø  Síndrome de cushing (hiper adrenocorticismo).
El aumento aparece tanto en hiper adrenocorticismo secundario como en caso de neoplasia adrenal; se observa un incremento marcado en el 95% de los perros aunque no en los gatos.
Ø   Terapia con glucocorticoides.





Al final puede conducir a un síndrome de cushing. Los glucocorticoides ya sean endógenos o administrados, inducen un isoenzima específica de la ALP en perro, pero no en gato (fosfatasa alcalina inducida por esteroides), que actualmente se puede determinar por separado. Esta enzima explica los grandes incrementos en la actividad de la ALP en el perro hasta 200 veces más  que el límite superior normal.

3.16.2.4 ANIMALES EN CRECIMIENTO.
La isoenzima ósea de la ALP se encuentra en el plasma de animales jóvenes en crecimiento especialmente en razas grandes. En ellos esta isoenzima es la que contribuye en mayor parte a la actividad total de la ALP.
La actividad puede ser seis veces mayor al límite superior normal debido a la elevada actividad osteoblástica (en especial en los 6-9 primeros meses de vida), aunque normalmente es mucho menor.
Los niveles altos en animales jóvenes pueden por lo tanto ser normales si son inferiores a seis veces el límite superior normal.

3.16.2.5 ENFERMEDAD ÓSEA EXTENSA O GENERALIZADA.

Una elevada actividad osteoblástica  produce ligeros incrementos en la actividad de la ALP en perros y en algo mayores en gatos. Esto ocurre en los siguientes casos:
-          Hiperadrenocorticismo:
La actividad de la ALP puede ser normal o estar elevada junto con cambio en los niveles de calcio y fósforo inorgánico.
Las causas de hiperpartiroidismo son:
-          hiperparatiroidismo renal secundario.
Comprobar el aumento de los niveles de urea y creatinina.
                        -   hiperparatiroidismo nutricional secundario
                        -   hiperpartiroidismo primario.
-          seudo hiperparatiroidismo.
Se origina como consecuencia de tumores que  no afectan  a la  paratiroides  pero que


producen hormona paratiroidea o una sustancia similar (principalmente linfosarcoma y adenocarcinoma perianales y perirectales).

3.16.2.6 PANOTEITIS CANINA.

Tumores óseos. Los principales ejemplos son osteosarcomas primarios y carcinoma que metastizan en el hueso.

3.16.2.7 CICATRIZACIÓN ÓSEA.

La actividad de la ALP incrementa con una cicatrización extensa por ejemplo de fracturas.
3.16.2.8 OSTEOARTROPATÍA CRANEOMANDIBULAR.
-          RAQUITISMO (Osteomalasia)
Para el diagnóstico es importante hacer radiografías junto con estimaciones de calcio y de fósforo inorgánico.
-          OTROS TRANSTORNOS ENDÓCRINOS.
Además del hiper adrenocorticismo y del hiperparatiroidismo, otras endocrinopatías pueden estar asociadas al aumento de la actividad de la ALP.
Ø  Acromegalia.
El aumento se debe al efecto de la hormona del crecimiento sobre el hueso, a la lipidosis hepática y/o al efecto esteroideo de la progesterona y de los progestágenos.
Ø  Hipertiroidismo.
En más del 90 % de los casos en gatos la actividad total de la ALP se halla elevada, lo que probablemente se deba al incremento de  isoenzima ósea como sucede en los seres humanos.
Ø  Tumores tiroideos.
En algunos casos el aumento de la ALP en perros puede estar relacionado con la hipercalcemia.
Ø  Diabetes mellitus.




En perros y gatos diabéticos (particularmente cetoacidoticos) puede haber una actividad de la ALP elevada relacionada con la lipidosis hepática.
Incrementos leves también pueden conservarse en casos de hipotiroidismo (incostantes) hiperinsulinismo y síndrome de Zollinger-Ellison, (exceso de secreción de insulina).
3.16.2.9 NEOPLASIA.
Aparte de neoplasias del hígado, árbol biliar, hueso y glándulas adrenales  se observan incrementos en la actividad de la ALT, en tumores mamarios mixtos, linfosarcomas, hemangiosarcomas, sarcomas indiferenciados, mastocitos, melanomas malignos y carcinomas orales.
3.16.2.10 SEPTICEMIA ENDOTOXEMIA.
Puede observarse un incremento ligero de la ALP, probablemente debido a daño hepático hasta cinco veces más que el límite superior normal en perros.

3.16.2.11 INDUCCIÓN POR FÁRMACOS.

Un aumento en la actividad de la ALT puede ser inducido por otros fármacos entre ellos cabe mencionar:

Ø  Anticonvulsivantes: primidona y fenitioma, el aumento es de 3 a 5 veces mayor al límite superior normal.
Ø  Barbitúricos por ejemplo: el fenobarbital aumenta la actividad hasta 30 veces el límite superior normal.
Ø  Dieldrin, mebendazol, tiacetersamida y ciertos antibióticos también se ha descrito como inductores de la actividad.

3.16.2.12 INANICIÓN GRAVE
           El aumento está asociado a la lipidosis hepática.

3.16.2.13 REGENERACIÓN HEPÁTICA.



 
Se han descrito valores elevados de la actividad de la ALP     hasta   seis semanas después de una hepatectomía parcial.
-          GATAS GESTANTES.
                            Incrementos modestos en la ALP son probablemente de       origen   placentario.
-          GALGOS SOMETIDOS A ENTRENAMIENTOS.
La actividad de la ALP puede ser dos veces pued que  aumenta la actividad de llegar a ser 2 veces mayor que el límite superior normal.
-          DIETA DE PRESCRIPCIÓN EN PERROS
                      Se ha descrito que aumenta la actividad de la ALP
-          TRAUMATISMOS.
    La actividad de la ALP se halla a menudo elevada en  casos de traumatismos (por ejemplo accidentes de tráfico).

3.17  FOSFATASA ÁCIDA (ACP)

Esta enzima tiene varias iso enzimas en distintos órganos (bazo, riñón, hígado, intestino, sangre y hueso) incluyendo la próstata, la actividad de la isoenzima prostática.
El intervalo normal de referencia depende del método utilizado.

3.17.1       ACTIVIDAD ELEVADA.

Hay indicios de que en el perro como en los humanos, un gran aumento de la actividad de la isoenzima prostática de la ACP se puede atribuir a una carcinoma prostático.
Especialmente cuando la ha metastizado al hueso. Incrementos menores han sido asociados a prostatitis, pero cualquiera de los dos procesos puede estar presente sin producir ninguna alteración en la actividad de la ACP.

3.18 ALBÚMINA SÉRICA
La albúmina es una proteína que se encuentra en gran proporción en el plasma sanguíneo, siendo la principal proteína de la sangre y una de las más abundantes en el ser humano, es sintetizada en el hígado.

3.18.1 FUNCIONES DE LA ALBÚMINA.

Ø  Mantenimiento de la presión oncótica.
Ø  Transporte de hormonas tiroideas.
Ø  Transporte de hormonas liposolubles.
Ø  Transporte de ácidos grasos libres.
Ø  Transporte de bilirrubina no conjugada.
Ø  Transporte de muchos fármacos y drogas.
Ø  Unión competitiva con iones de calcio.
Ø  Control de ph,
Ø  Funciona como un transportador de la sangre y lo contiene el plasma.
Ø  Reguladores de líquidos extracelulares.21

La albúmina es una proteína sintetizada en el hígado, permanece en circulación unos
19 días, hasta que es metabolizada en los tejidos para los que es fuente de aminoácidos, se encuentra en mayor concentración en el plasma sanguíneo, constituyendo del 50 al 60% del total de las proteínas plasmáticas. Sus funciones más importantes guardan relación con su tamaño que la mantiene dentro del torrente circulatorio, contribuyendo a transportar moléculas de pequeño tamaño ( ácidos grasos, bilirrubina, progesterona, drogas, etc.) es la más homogénea, soluble, estable y de mayor movilidad electroforética de todas las proteínas plasmáticas, también de vital importancia para el mantenimiento de la presión oncótica de la sangre  (la presencia de un valor normal de albúmina en la sangre impide el pasaje de agua desde la sangre a los tejidos) las moléculas de albumina ofrecen  una  superficie  total
importante para la absorción de tóxicos lo que les otorga la capacidad de unirse a  muchos iones.22





3.18.2 ALBÚMINA EN PLASMA

Las unidades de medida del sistema internacional son los gramos por litro (g/l) aunque la albúmina puede medirse en micro mol por litro mmo/l. se utilizan por consistencia las mismas unidades que para estimación de los niveles de proteínas totales (que se mide en g/l porque conforman varias proteínas de pesos moleculares diferentes).14

 FACTORES DE CONVERSIÓN: G/L

Ø  Para convertir G/DL. EN G/L multiplicar por 10
Ø  Para convertir g/l en g/dl multiplicar por 0.1

 INTERVALO DE REFERENCIA NORMAL
Perros y gatos 25-40 g/l (2.5-4 g/dl)
Los intervalos de referencia normal pueden variar de forma considerable entre laboratorios, por eso se aconseja la comprobación.

EDAD
En edades avanzadas el nivel de albúmina tiende a disminuir ligeramente.
La diferencia entre el nivel de las proteínas plasmáticas totales y el nivel de albúmina, representa la cantidad de globulinas presentes. A partir de la albúmina y de las globulinas puede calcularse el cociente a/g.

COCIENTE ALBÚMINA/GLOBULINA (A/G)
Perro: 0.5-1.3
Gato: 0.4-1-3

3.18.3 ORIGEN Y FUNCIÓN:

La albúmina se sintetiza en el hígado a partir de los aminoácidos (aproximadamente 0.15-0.2 gr por kg de peso vivo por día), y constituye un 35-40% de las proteínas plasmáticas totales. Es la principal forma de almacenamiento de proteínas y la fuente
de aminoácido de los tejidos además de ser la mayor responsable de la presión osmótica coloidal de la sangre. Se une a muchas sustancias transportándolas (incluyendo la bilirrubina no conjugada, los ácidos grados libres, una parte de las toxinas y muchos fármacos). El calcio también se transporta unido a la albúmina por lo que una hipoalbuminemia  puede producir hipocalcemia (no en el caso de la tetania hipocalcémica porque sólo está reducida la fracción ligada no la ionizada).
La albúmina tiene un peso molecular inferior al de otras proteínas plasmáticas y existe intercambio frecuente de albúmina entre el plasma y el líquido intersticial, retornando desde este a la sangre por vía linfática.

MÉTODO DE MEDIDA.
La concentración de albúmina se determina por la unión al colorante verde de bromo cresol (BCG).

PRECISIÓN
Se producen falsos niveles de albúmina porque:
Ø  Los niveles disminuidos  de albúmina pueden dar valores falsamente elevados, si el colorante se une a otras proteínas.
Ø  Ciertos fármacos (aspirina, carvenicilina) pueden disminuir falsamente las lecturas de los niveles de albúmina porque compiten con estas en la unión al bromo cresol.

3.18.4 CAUSA DEL INCREMENTO DE LOS NIVELES PLASMÁTICOS DE ALBÚMINA.(HIPERALBUMINEMIA).

Los incrementos absolutos de los niveles de albúmina no se producen, aunque se han descrito aumentos después de una terapia esteroidea anabólica (en galgos) los incrementos se deben a una de las siguientes causas:
Deshidratación: puede aparecer como consecuencia de vómitos graves, diarreas y desórdenes poliúricos o privaciones prolongadas del agua de bebida, lo cual agravaría el aumento de las pérdidas de agua.


Se presenta un incremento del valor hematocrito asociado a estos niveles elevados de albúmina aunque el cociente albúmina-globulina A/G se mantiene normal (porque albúmina y globulina se afectan en igual grado por las pérdidas de agua plasmática.

ERROR:
       Interferencia farmacológica.
Ø  Las penicilinas interfieren con el método BCG. La terapia con ampicilina producen ligeros incrementos en los valores de albúmina, aunque prácticamente este efecto es insuficiente.
Ø  La adición de heparina en grandes cantidades en las muestras sanguíneas pueden producir variaciones considerables de los valores de albúmina (incrementos y decrementos).

3.18.5 CAUSAS DE DISMINUCIÓN DE LOS NIVELES PLASMÁTICOS DE ALBÚMINA (HIPOALBUMINEMIA).
Ø  Disminución relativa, sobre hidratación y error.
Ø  Disminución de la síntesis proteica
Ø  Inanición proteica
Ø  Mal absorción del intestino delgado
Ø  Procesos hepáticos
Ø  Traumatismo grave
Ø  Insuficiencia cardiaca congestiva
Ø  Enanismo hipofisiario
Ø  Terapia con primidona

3.18.6 INCREMENTO DE LAS PÉRDIDAS PROTEÍCAS
Ø  En orina
Ø  Del intestino
Ø  De quemaduras
Ø  Sepsis y bacteriemia
Ø  Dieta
Ø  Error: interferencia con el método de medición (método BCG).

3.18.7 DISMINUCIONES RELATIVAS (INCLUYENDO LAS COMETIDAS POR ERROR).
Se deben al aumento del contenido de agua plasmática; puede presentarse un aumento relativo de agua en el plasma cuando:
Ø  El paciente está sobre hidratado por fluidos intravenosos
Ø  La muestra sanguínea se extrae de una vena en la cual se está administrando fluidos.
Ø  La muestra se extrae de la misma aguja o cánula que se está utilizando para administrar los fluidos extra venosos.

3.18.8 DISMINUCIÓN DE SÍNTESIS PROTEICA.

Ø  Inanición proteica.
Se refiere a la inanición debida a una alimentación prolongada con dietas extraordinariamente pobres en proteínas o incluso a la inanición completa.
Ø  Mal absorción de intestino delgado.
 Puede acompañarse por una enteropatía por pérdida de   proteínas y es la característica más importante.
Ø  Procesos hepáticos.
Incluye procesos en los cuales existe un fallo en la síntesis hepática de cantidades adecuadas de proteínas; como en el caso de la disfunción hepática grave (insuficiencia hepática), o los shunts portosistémicos.
En el gato el efecto de estos procesos no es tan común y la hipoalbuminemia se produce raramente, en la enfermedad hepática crónica, sin que constituya una característica de los shunts portosistémicos.
Ø  Traumatismo grave.
La disminución de síntesis sin cambios catabólicos puede causar una caída rápida de los niveles de albúmina alcanzado valores mínimos después de tres a seis días.
Ø  Insuficiencia cardiaca congestiva.
La dilución de la albúmina por la  retención de agua, las pérdidas proteicas en el líquido ascítico, la disminución de la ingesta de alimento, la mala absorción proteica y las pérdidas de proteínas gastrointestinales se combinan para producir una disminución de los niveles de albúmina.
Ø  Enanismo hipofisiario.
La reducción de la concentración de albúmina se debe a la falta del efecto anabólico de la hormona de crecimiento.
Ø  Terapia con primidoma.
La terapia prolongada con primidoma disminuye los niveles de albúmina en aproximadamente el 70% de los perros debido a una disminución de una actividad hepática.

3.18.9 INCREMENTO DE LAS PÉRDIDAS DE PROTEÍNA.

Ø  Pérdida de proteína por orina.

Es particularmente una característica de enfermedades glomerulares primarias (glomérulo nefritis y amiloidosis renal), y puede desarrollarse un síndrome nefrótico. La albúmina es una proteína que mayoritariamente se pierde ya que es una molécula más pequeña. Con lo que se produce una disminución del cociente A/G.
Ø  Pérdida de proteína por el intestino.
Normalmente se pierde por igual albúminas y globulinas en las enteropatías por pérdida de proteínas, como en el linfosarcoma y otras neoplasias; en la infección entérica por parvovirus, en la enteritis eosinofílica en la linfangiestasia y en la histoplasmosis.
Las pérdidas pueden ser significativas en las úlceras que afectan el estómago y/o duodeno proximal (úlceras pépticas), o intestino grueso (colon y recto), con colitis ulcerativa; la ulceración es probablemente la causa de las pérdidas gastrointestinales de albúminas y el incremento de la uremia.
Ø  Pérdida de proteínas por quemaduras.
La albumina se pierde en caso de quemaduras y el de lesiones graves y exudativas.


Ø  Hemorragias.
Dos o tres horas después de producirse una hemorragia grave se hace evidente la reducción de albúmina (y de globulina) acompañado por una disminución en el valor hematocrito.
Ø  Sepsis y bacteriemia  
Un incremento en la permeabilidad capilar permite la filtración de albúmina hacia el líquido extracelular, este efecto puede asociarse a una disminución de la síntesis hepática en el hígado.
Ø   Dieta
La alimentación prolongada con una dieta HILL`S para la disolución de los cálculos de estruvita en el perro puede provocar cierto grado de hipoalbuminemia.
Ø  Error
La interferencia puede deberse a la presencia de bilirrubina en grandes cantidades o a la de algunos fármacos como:
-          Carbencilina
-          Aspirina
-          Anticonvulsivantes: se describen como productores de disminución de los valores de albúmina, también se asocia con los niveles bajos de albúminas.
-          Una disminución del nivel de urea debido a la reducción del catabolismo proteico.
-          Una disminución del nivel de calcio, debido a una reducción de la fracción que se liga a la albúmina
-          Casi todas las causas de la disminución del nivel de proteínas plasmáticas totales (hipoproteinemia) produce también un descenso en los niveles de albúmina.

3.19   BILIRRUBINA EN PLASMA

         3.19.1 Origen.




La mayor parte de la bilirrubina en plasma deriva de la degradación (es decir fagocitosis) de los eritrocitos viejos por parte del sistema mononuclear fagocitario (en esencia, el mismo que el sistema retículo endotelial), especialmente en el bazo; la bilirrubina restante proviene de la degradación de la mioglobina de los citocromos y de los eritrocitos inmaduros en la médula ósea.
La hemoglobina liberada de los eritrocitos se escinde a la globina (que se conserva en el almacén de proteínas del organismo) y grupo hemo. Después de la extracción de la molécula de hierro (que se almacena y/o se utiliza) el grupo hemo se convierte en bilirrubina. En la hemólisis intravascular ¨la hemoglobina se retira del plasma mediante el sistema mononuclear fagocitario (smf) principalmente aunque las células hepáticas y las células tubulares renales pueden retirar pequeñas cantidades¨.
La bilirrubina así formada es la llamada no conjugada que se transporta al hígado ligada a la albúmina plasmática. También se conoce como bilirrubina libre, hepática o reactiva indirecta. No es soluble en agua pero si en lípidos y por tanto no se filtra a través de los glomérulos renales  y normalmente  no se excreta por la orina.14
La bilirrubina no conjugada no se encuentra ligada a la albúmina cuando:
Ø  Los niveles de albúmina son extremadamente bajos.
Ø  Existe una competición de los lugares de unión a la albúmina, por ejemplo, con tiroxina, salicilatos, sulfamidas, digoxina cortisol o diazepan.
Ø  Cuando el nivel de la bilirrubina no conjugada es extremadamente alto.
En el hígado se deshace la unión a la albúmina y en los hepatocitos la bilirrubina se conjuga con ácido glucorónico para formar bilirrubina conjugada, (también conocida como bilirrubina poshepática o reactiva directa). Es soluble en agua, se secreta  por los canalículos biliares menores y más tarde se excreta  por la bilis.
En el plasma se presenta cantidades bajas de bilirrubina conjugada; en animales sanos la mayor parte de bilirrubina es no conjugada. La bilirrubina conjugada no puede absorberse en el intestino, pero si en el ileón y colon, las enzimas bacterianas lo convierten en urobilinógeno, incoloro (urobilinógeno fecal o estercobilinógeno) reabsorbiéndose como tal en un 10-15% en la circulación portal hasta el hígado.


La mayoría de este urobilinógeno se excreta en la bilis aunque una parte se excreta por orina.
El urobilinógeno restante se oxida a estercobilina que da a las heces su característico color marrón.
El incremento de los niveles de bilirrubina en el plasma (híper bilirrubinemia) puede producirse por los seis defectos siguientes:
 

  1. Exceso de  producción  de   bilirrubina
no conjugada por las células hepáticas
debido a la hemoglobina.                                    DAÑO HEPATOCELULAR                           
  1. Defecto   en la toma   de bilirrubina no
Conjugada por las células hepáticas. 
 

  1. Conjugación defectuosa de la bilirrubina
no conjugada por las células hepáticas.           DAÑO HEPATOCELULAR
  1. Excreción    defectuosa   de la bilirrubina   
conjugada por las células hepáticas.
 

  1. Obstrucción del flujo biliar dentro del hí-
gado a menudo debido a la inflamación,-
provocando edematización de las células           COLESTASIS
  1. Obstrucción del flujo biliar fuera del híga
do, debido a un bloqueo o comprensión,-
del conducto biliar.


3.19.2     CAUSAS DEL INCREMENTO DE LOS NIVELES PLASMÁTICOS DE BILIRRUBINA CONJUGADA.
 Obstrucción del flujo biliar
         
Ø  Hemólisis aguda grave.
Ø  Absorción de un gran hematoma o hemografía interna masiva
Ø  Transfusión de eritrocitos almacenados
Ø  Aumento al mismo nivel de bilirrubina conjugada y no conjugada
Ø  Perdida de funcionalidad hepatocelular
Ø  Obstrucción del flujo biliar
Ø  Consiguiente a una hemólisis intravascular aguda grave
Ø  Daño tóxico
Ø  Enfermedades infecciosas
Ø  Parásitos, dístomas
Ø  Traumatismo grave
Ø  Hepatitis crónica activa
Ø  Desórdenes mielo proliferativos
Ø  Daño hepático secundario
Ø  Presión de los hepatocitos inflamados
Ø  Lesión que ocupa espacio
Ø  Deposición de tejido anormal en hígado
Ø  Hepatitis progranulomatosa
Ø  Obstrucción del conducto biliar
Ø  Inflamación del tracto biliar
Ø  Insuficiencia cardiaca directa
Ø  Enfermedad quística congénita
Ø  Rotura del árbol biliar.




















IV.   HIPÓTESIS




4.1 H.I: CON LA VALORACIÓN DE LAS TRANSAMINASAS ALANINA AMINO TRANSFERASA (ALT), LA ASPARTATO AMINOTRANSFERASA (AST), LA FOSFATASA ALCALINA (FA), Y LA ALBÚMINA SÉRICA DETERMINAMOS UN PERFIL HEPÁTICO PARA PERROS GERIÁTRICOS.
























V. MATERIALES Y MÉTODOS

 5.1 Materiales
        5.1.1 Localización del ensayo
                 CANTON: Guayaquil
                 PROVINCIA: Guayas
                 PAIS: Ecuador
       5.1.1.2 características geográficas.
Ø  Altitud media: 3 metros. Sobre el nivel del mar
Ø  Latitud sur: 2ª 10` S
Ø  Longitud occidental: 79ª 54`

       5.1.1.3 Características ecológicas

Ø  Clima: Guayaquil tiene un clima cálido con 2 períodos climáticos bien marcados, el invierno lluvioso y húmedo muy caluroso que va desde diciembre hasta abril, y el verano que va de mayo a diciembre caracterizado por ser una etapa seca con menor humedad.
Ø  Temperatura: la temperatura oscila entre 20 y 27 grados.
Ø  Precipitación: 80 por ciento
Ø  Heleofonía: 1250.6 horas valor anual.
Ø  Humedad máxima: 98 por ciento, humedad mínima 47%
Ø  Media: 72.5 %
Ø  Vientos  promedio: 1.2 metros por segundo.
Ø  Topografía: Guayaquil se encuentra situada en la cuenca baja del río Guayas que nace en las provincias de Pichincha y Cotopaxi, y se desemboca en el golfo de Guayaquil en el océano Pacífico.

          5.1.2 Materiales de extracción de muestras.

·          alcohol, algodón
·          nevera de conservación con pila.
·          torniquete
·          bozal
·          jeringuillas de 5 cc. y  de 3 cc.
·         agujas
·         esparadrapo
·         tubos de ensayo

         5.1.3 Equipo y materiales de laboratorio
·         espectrofotómetro   BIOSISTEM BTS-350
·         baño maría
·         centrífuga 2.500 revoluciones
·         refrigerador
·         tubos ependof
·          pipetas, puntas
·          reloj cronométrico
·          reactivos.
·          agua destilada
·          computadora
·          lápices, marcadores
         5.1.4 material de limpieza
·          detergente
·          desinfectante
·          guantes
·          fundas de basura
·          
         5.1.5 equipo de oficina
·         computadora laptop
·          impresora




·          cámara digital
·          cuaderno de registro
·          hojas de papel bond
·          marcadores
·          cd

          5.1.6 otros
·         Transportación

5.2 MÉTODOS

         5.2.1   Recepción de la muestra
       Una    vez seleccionado el paciente acudimos hasta el lugar   para proceder a la extracción de la muestra, tratamos de  que   el  perro  esté totalmente relajado para evitar los inconvenientes,  en algunos  casos hubo la necesidad de utilizar bozal, pero llegamos a la conclusión  de que no era lo más aconsejable; lo conveniente fue que el dueño del animal lo tranquilizara y así se logró nuestro cometido sin mayores   problemas, se rasuró una pequeña área en   el  dorso del antebrazo, por lo general la extracción se la hizo de    la vena cefálica.
 Aunque    en algunos casos lo hicimos de la vena safena. En las extremidades posteriores, a continuación         desinfectamos el área y procedimos a la extracción de 3cc. de sangre venosa retiramos la aguja, destapamos el tubo y vertemos el contenido de la jeringuilla   al tubo, lo tapamos y lo etiquetamos con un número y con el nombre del animal, después estos tubos  los ubicamos en una pequeña nevera con una pila: a continuación se procedió a recopilar los datos clínicos del paciente entre otros: la costumbre alimenticia, su fecha de nacimiento, la raza, el tamaño, el nombre del perro, nombre del propietario y dirección, además de la inspección que nos determina el estado aparente del animal.





Las muestras así obtenidas las trasladamos hasta el laboratorio donde ocurre la recepción, y protocolo de la muestra.
                                           
                   Toma de muestra a un perro maltés
            photo (1)
            Arturo Moreira 2012                                              Tesis de grado
                                 
 5.2.2 Proceso de la determinación de los niveles enzimáticos de la  Alanino amino  transferasa, (ALT), Aspartato amino transferasa, (AST), fosfatasa alcalina, (FAS), y albúmina sérica, (ALS).

         5.2.2.1 proceso para la determinación de los niveles enzimáticos, de la Alanino
                     amino transferasa (ALT).
Ø  Recepción de muestras e identificación de cada muestra con su protocolo correspondiente.
Ø  Colocar los tubos rotulados al baño maría por 20 minutos.
Ø  Se coloca en la centrífuga por cinco minutos a 1500 RPM, cada tubo debe estar nivelado con otro del mismo tamaño.



Ø  Se obtiene el suero utilizando pipetas Pasteur; se coloca en ependorf con su protocolo respectivo.
Ø  En una gradilla se colocan tubos de ensayos rotulados para cada uno de los bioquímicos correspondientes.
Ø  Colocación de reactivos
Ø  Para la ALT utilizamos 2 reactivos A y B.
Reactivo A ------ 1ml.
                                    Reactivo B ------ 0,5 ml
                                    Se carga tubos con 1 ml. En cada uno, se lleva a baño maría.
Ø  Una vez que tenemos este material preparado encendemos el espectofotómetro BIOSYSTEMS que es semiautomático mismo que se calienta por cinco minutos,  se auto regula y nos deja saber cuando está listo. Se busca en la pantalla lo que queremos averiguar, en este caso ALT y digitamos.
Ø  Se introduce una línea base que es agua destilada.
Ø  Luego la máquina nos pide la muestra, mismo que es absorbido en la cantidad necesaria, que previamente ha sido mezclada con el reactivo. 
Ø  La lectura de cada prueba enzimática dura cuatro minutos.
Ø  Se obtiene resultados de cada paciente
Ø  Se digitaliza y se realiza un informe.

5.2.2.2 proceso para la determinación de niveles enzimáticos de la  aspar-
            tato amino transferasa (AST)

Ø  En este caso al igual que el anterior seguimos todo el proceso etiquetamos los tubos con AST  y el número de cada muestra. De la misma manera utilizamos dos reactivos, reactivo A  con 1ml, y reactivo B medio mililitro. Para obtener nuestro reactivo de trabajo para la AST.
Así mismo que en la ALT esperamos cuatro minutos y la máquina nos da resultado, de la misma manera introducimos los datos en la computadora y luego se imprime.

           5.2.2.3 Proceso para la determinación de los niveles de fosfatasa alcalina.

Ø  Después de repetirse el proceso anterior, para el caso de la   fosfatasa alcalina, utilizamos el reactivo BIOSYSTEMS
Reactivo   A ----- 1ml.
                                    Reactivo   B ----- 0,5 ml.
                                    De la mezcla de estos 2 reactivos obtenemos el reactivo de          trabajo.
                                    Luego el proceso continúa de la misma manera que el anterior.

5.2.2.4 en el caso de la albúmina sérica utilizamos un solo reactivo y                                          cargamos  los tubos con  0,5ml. Cada uno.
Es importante dejar en claro que el proceso de determinación de los niveles de albúmina es un proceso colorimétrico y en el caso de las, transaminasas que es un proceso cinético.
2012-05-10 11


Mezcla de suero y reactivo
          Arturo Moreira.2012                                 tesis de grado



5.2.3 PROCESO PARA LA EVALUACIÓN DEL PERFIL HEPÁTICO PARA PERROS GERIÁTRICOS DE ACUERDO A LA EDAD, TAMAÑO,                    SEXO, CONDICIÓN CLÍNICA Y CONDUCTA ALIMENTICIA.

      5.2.3.1 EDAD.
                   Para evaluarlos respecto a la edad fueron agrupados de la siguiente manera: de siete a ocho años, de nueve a diez años, y de diez años en adelante. Se realizó la sumatoria y se obtuvo los promedios.

      5.2.3.2 TAMAÑO.
                   De la misma manera se los agrupó en grandes medianos y pequeños, se realizó la sumatoria y se sacó el promedio.

      5.2.3.3 SEXO.
                  En este caso se separó en femenino y masculino, ser realizó la sumatoria y se sacó el promedio de cada grupo.

     5.2.3.4 CONDICIÓN CLÍNICA.
                  Para este parámetro se consideró tres grupos: condición buena, regular y mala, de la misma manera se realizó la sumatoria y el promedio.

     5.2.3.5 CONDUCTA ALIMENTICIA.
                 Para la conducta alimenticia se los agrupó en: a los que sólo comían    balanceado, los que comían comida casera y los que su alimentación era mixta.






         








VI. RESULTADOS EXPERIMENTALES



6.1     Determinación de los niveles enzimáticos de la Alanino amino transferasa (ALT), aspartato amino transferasa (AST), fosfatasa alcalina (FAS),     y Albúmina sérica (ALS).

Con la finalidad de conocer los parámetros en perros geriátricos se agruparon teniendo en cuenta la edad, el tamaño de la raza, el sexo, la condición clínica y la conducta alimenticia.
En el cuadro 1 que es un cuadro global se puede observar los niveles obtenidos de ALT, AST, FAS y ALS, que constan en el anexo 1 y se grafican en la figura 1.
Se obtuvo un valor promedio de ALT de U/L 90, el valor promedio de AST fue de U/L 84, el promedio de FAS fue de  U/L  91, y el promedio de ALS fue de  G/L 26.
Se consideró como referencia al valor mínimo pedido y al más alto. En el anexo 1 aparecen los valore obtenidos de manera global.

6.2     evaluación del perfil hepático de acuerdo a la edad, tamaño, sexo, condición clínica, y conducta alimenticia.

6.2.1        evaluación de resultados teniendo en cuenta la edad.
Ø  En este caso se evaluó los resultados agrupándolos en 3 edades: de 7-8                  años, de 9-10 años y de más de 10 años.
       En el cuadro 2, en el cuadro 3, anexo 3 y figura 3 y 4 se obtuvo los           siguientes resultados para el grupo de 7-8 años: ALT U/L 91; AST U/L 82; FAS U/L 88 Y ALMÚMINA SÉRICA G/L 26..
Ø  De 9 a 10 años en el cuadro 3, anexo 3 y figura 5 y 6 se obtuvo los siguientes resultados: para la ALT U/L 90, para la  AST U/L 86, para la FOSFATASA ALCALINA U/L 95, y para la ALBÚMINA SÉRICA G/L 26.




Ø  De más de 10 años este corresponde al cuadro 4, anexo 4 y figuras 7 y 8, obteniendo los siguientes valores: para la ALT U/L 82, para la AST U/L 85, para la FAS U/L 91 y para la albúmina sérica G/L 25.

     6.2.2 Evaluación de resultados teniendo en cuenta el tamaño.

Hace referencia  a una clasificación general considerando, razas grandes, medianas y pequeñas.
Ø  TAMAÑO GRANDE:
En el cuadro 5, anexo 5 y figura 9 y 10 se obtuvo los siguientes resultados para la ALT U7l 96, para la AST, U7l 84, para la FAS, U/L 92 y para la  ALBÚMINA SERICA G/L 25.

Ø  TAMAÑO MEDIANO:
En el cuadro 6, anexo 6 y figuras 11 y 12 se obtuvo  los  siguientes niveles para los peros de tamaño mediano: para la ALT U/L 89, para la AST U/L 84, para la FOSFATASA ALCALINA U/L 88 y para la FOSFATASA ALCALINA G/L 25.

Ø  TAMAÑO PEQUEÑO:
En el cuadro 7, anexo 7 y figuras 13 y 14 se obtuvo los siguientes promedios, ALT U/L 84, AST U/L 83, para la FOSFATASA ALCALINA U/L 91 y para la fosfatasa alcalina G/L 26.

      6.2.3 Evaluación de resultados teniendo en cuenta el sexo.
Ø  SEXO FEMENINO:
En el cuadro 8, anexo 8, figuras 15 y 16, se obtuvo los siguientes niveles, para la ALT U/L 92; para la AST U/L 81; para la FAS U/L 90; y para la ALBÚMINA SÉRICA G/L 25.

Ø  SEXO MASCULINO:
En el cuadro 9, anexo 9, figuras 17 y 18 se obtuvo los siguientes promedios: para la ALT U/L 88; AST U/L 86; para la FAS U/L 98 y para la ALBÚMINA SÉRICA G/L 25.

      6.2.4 Evaluación de resultados teniendo en cuenta la condición clínica.

* BUENA: se consideró a los perros de los cuales los propietarios manifiestan que no tienen ninguna afección y que a la inspección lucen aparentemente sanos.
** REGULAR: aquellos perros que a la inspección presentan sobre todo problemas de piel y se nota cierto estado de desnutrición.
*** MALA: son aquellos animales que se muestran raquíticos con pérdida del panículo adiposo alguno de ellos han perdido parcial o totalmente la visión.

Ø  BUENA.-
En el cuadro 10, anexo 10, y figuras 19 y 20 se obtuvo los siguientes promedios.
Para la ALT U/L 79; para la AST U/L 76; para la FAS U/L 79; y para la ALBÚMINA SÉRICA G/L 25.

Ø  REGULAR.-
En el cuadro 11, anexo 11, figuras 21 y 22 se obtuvo los siguientes promedios.
Para la ALT U/L 86; para la AST U/L 84; para la FAS U/L 93; y para la ALBÚMINA SÉRICA G/L 24.

Ø  MALA.-
En el cuadro 12, anexo 12 y figuras 23 y 24 se obtuvo los siguientes resultados.
Para la ALT U/L 119; para la AST U/L 98; para la FAS U/L 105; y para la ALBÚMINA SÉRICA G/L.



     6.2.5 Evaluación de resultados teniendo en cuenta la conducta alimenticia.


Ø  ALIMENTACIÓN BALANCEADA.-
En el cuadro 13, anexo 13 y figuras 25 y 26 se obtuvo los siguientes promedios.
Para la ALT U/L 88; para la AST U/L 80; para la FAS U/L 96, y para la ALBÚMINA SÉRICA G/L 24.
Ø  COMIDA CASERA.-
En el cuadro 14, anexo 14 y figuras 27 y 28 se obtuvo los siguientes promedios.
Para la ALT U/L 82; para la AST U/L 85; para la FAS U/L 89 y para la ALBÚMINA SÉRICA G/L 25.
Ø  COMIDA MIXTA.-
En el cuadro 15, anexo 15 y figuras 29 y 30 se obtuvo los siguientes resultados.
Para la ALT U/L 95; para la AST U/L 81; para la FAS U/L 90 y para la ALBÚMINA SÉRICA G/L 25.
En el cuadro 16, se hace una comparación de resultados en los cinco parámetros antes mencionados misma que se explica en el capítulo sexto de conclusiones.








VII. DISCUSIÓN Y CONCLUSIONES


7.1 DISCUSIÓN.

Para interpretar un valor enzimático de un laboratorio en concreto es necesario conocer el valor de referencia del laboratorio para el método utilizado.14
En nuestro caso tomamos la referencia de los laboratorios Diagnovet mismos que nos manifestaron que ellos manejaban intervalos locales en base a un trabajo por ellos realizado con 200 perros sanos, producto de lo cual obtuvieron los siguientes niveles de referencia.
Alanina  amino transferasa (ALT)………………………………………….U/L 19-72
Aspartato amino transferasa (AST)………………………………………....U/L 18-69
Fosfatasa alcalina                  (FAS)………………………………………...U/L 21-88
Albúmina sérica                    (ALS)………………………………………...G/L 24-36
     En este trabajo encontramos los siguientes niveles de referencia que hace notar los datos más bajos y más altos obtenidos en los cinco parámetros estudiados.
Alanina amino transferasa (ALT)…………………………………………U/L 37-215
Aspartato amino transferasa (AST)……………………………………….U/L 42-200
Fosfatasa alcalina (FAS)…………………………………………………..U/L 44-187
Albúmina sérica   (ALS)………………………………………………..G/L 17,2-38,1
De acuerdo a esta experiencia observamos la variación sin dejar de notar que en este caso se tomaron en cuenta perros de todas las edades, de todos los tamaños, sexo, condición clínica y conducta alimenticia.
Tenemos también que hacer notar que en el trabajo por ellos realizado, manifiestan que son 200 perros sanos y como sabemos los problemas hepáticos los cuales varían los niveles enzimáticos, en la mayoría de los casos no presentan síntomas en sus inicios y se debió considerar animales aparentemente sanos.






7.2 CONCLUSIONES.

   De acuerdo a los resultados obtenidos y comparándolos con los grupos en los que se refiere a la edad de acuerdo a los promedios no hay mayor variación, en todo caso en las tres edades han superado el nivel referencial en cuanto a la ALT. En cuanto a lo que se refiere a la AST igualmente han superado el nivel de referencia pero entre los grupos no es muy notoria la variación; respecto a la fosfatasa alcalina en los grupos de 9 a 10 años y de 10 años en adelante se observa un tanto elevado en relación a los de 7 a 8 años; la albúmina sérica se mantiene dentro del rango de los tres grupos.
 En lo que se refiere al tamaño, los grandes son los que presentaron un promedio más elevado del ALT, en cuanto a la AST no hay mayor diferencia aunque en los tres grupos rebasa el rango normal, en lo que se refiere a la Fosfatasa Alcalina igual que la ALT son de los de tamaño grande los que presentan mayor elevación de los niveles, y la albúmina sérica se mantiene en el rango normal de referencia en los tres grupos.
En cuanto al sexo, es en las hembras en la que la ALT se presenta más elevada en cambio la AST está más elevada en los machos igual que ocurre en la fosfatasa alcalina; la albúmina sérica en ambos  sexos se mantienen en el rango normal.
Respecto a la condición clínica; la condición clínica crítica presenta los niveles de ALT, AST, y FOSFATASA ALCALINA están más elevados y la albúmina sérica se encuentra en su rango normal.
En la condición clínica regular los rangos están moderadamente elevados en la ALT, AST, y FOSFATASA ALCALINA; la albúmina se mantiene en el rango normal.
En la condición clínica buena los niveles de ALT, AST Y FAS presentan una mínima elevación y la albúmina sérica se mantiene en su rango normal.
Respecto a la conducta alimenticia, en los que siempre se alimentaron con balanceado los niveles de ALT, AST se encuentran minimamente elevado, la FOSFATASA ALCALINA en este grupo es donde presenta su mayor elevación.
En los que se alimentaron con comida casera los niveles son algo similares a los que se alimentaron con balanceado.
En cambio los que tuvieron una alimentación mixta presenta los niveles de ALT más elevados, el nivel más bajo de la AST.
 Respecto a los otros grupos, el FAS se encuentra también elevado y la albúmina sérica en el rango normal.
Concluimos entonces que de todos estos parámetros lo que marco la diferencia fue definitivamente la edad.

































VIII.     RECOMENDACIONES

El perfil hepático está recomendado como parte de la revisión anual a las mascotas de más de siete años, debe ser completado con una historia clínica completa, un buen examen físico y prueba de imagen; lo que en pacientes geriátricos puede ayudar a detectar enfermedades subclínicas o a descartar ciertas patologías  que se desarrolla en estos animales.
Por lo tanto se recomienda realizar este perfil a pacientes aparentemente sanos, con el fin de detectar temprano las enfermedades.





















IX.   RESUMEN


El objetivo de este estudio fue caracterizar las concentraciones plasmáticas de las enzimas: Alanino amino tranferasa (ALT), Aspartato amino transferasa (AST), Fosfatasa alcalina (FAS), y la proteína Albúmina Sérica (ALS).
Se realizó un muestreo en la ciudad de Guayaquil en 150 perros geriátricos, se los agrupó de acuerdo a la edad, el tamaño, el sexo, la condición clínica y la conducta alimenticia.
Los resultados de los exámenes fueron clasificados según la edad: de 7 a 8 años, de 9 a 10 años y de 10 años en adelante, obteniéndose los siguientes promedios: ALT: U/L 90; AST: U/L 84: FAS: U/L 91: Y ALS: G/L: 26.
En lo que se refiere al tamaño se clasificó en: perros de razas grandes, de razas medianas y de razas pequeñas.
En cuanto al sexo se los agrupó en masculino y femenino.
Para evaluarlos por la condición clínica los agrupamos por: los que lucían aparentemente sanos los consideramos como de una condición clínica buena, los que presentaron problemas leves visibles a la inspección general los consideramos de condición clínica regular y los que presentaban problemas de raquitismo, pérdida de pelaje, problemas de piel o estaban postrados los consideramos como una condición clínica mala o crítica.
Para la conducta alimenticia fueron evaluados teniendo en cuenta: los que se alimentaron sólo con balanceado, los que se alimentaron sólo con comida casera y aquellos en los que su alimentación fue mixta.
Todos los promedios obtenidos en cada uno de los parámetros están explicados en los anexos y figuras correspondientes.













SUMMARY


The aim of this study was to characterize the plasma concentrations of enzymes: Alanine amino transferase (ALT), aspartate amino transferase (AST), alkaline phosphatase (FAS), and Serum Albumin protein (ALS).
Were sampled in the city of Guayaquil in 150 geriatric dogs are grouped according to age, size, sex, clinical condition and feeding behavior.
The test results were classified according to age: 7 to 8 years, 9 to 10 years and 10 years   and  older,  with the following averages: ALT: U / L 90, AST: U / L 84: FAS: U / L 91: And ALS: G / L: 26.
In regard to size was classified as: large breed dogs of medium breeds and small breeds.
As for sex were grouped into male and female.
To evaluate the clinical condition group them by: those who looked apparently healthy regard as a good clinical condition, those with mild problems visible to the inspector general we consider regular clinical condition and those with problems of stunting, loss of fur, skin problems or were prostrate consider them as a bad or critical clinical condition.
For eating behavior were evaluated taking into account: those fed only balanced, those fed with homemade food and only those in which their food was mixed.
All averages obtained in each of the parameters are explained in the annexes and corresponding figures.












X.   BIBLIOGRAFÍA

1.- Iglesias, I.; 2012.; Pérfil bioquímico. Amor de mascota.com; España. Pg.1-26,                                              26/mayo/2012. http://www.amordemascotas.com/article206htm.perfilbioquímico

2.- Laboratorios. I.; Guías de interpretación rápida. España. Pg. 1-3. 8/marzo/2012.

3.-Avellaneda. M.; 2012.; Perfiles de química sanguínea para perros y gatos.     Avellaneda. México. Pg. 1-2. 7/marzo/2012.

4. - Herrera. E.; 2009.; Bioquímica clínica. Madrid. España. Pg.1. 7/marzo/2012.

5.- Revista. A.; 2003. Bioquímica clínica en medicina veterinaria. Buenos Aires. Argentina. Pg. 1-2. 3/marzo/2012.

6.- Tabar. J.; 2011.; Fisiopatología del envejecimiento. Madrid. España. Pg. 1-14. 12/marzo/2012.

7.-  Cocca. T.; Hepatopatías. Nuevas fronteras terapéuticas. Madrid. España. Pg.1-2  12/marzo/2012.


8.- Willard. M.; 2000. Enfermedad Hepática y biliar. Parte I. Texas. U.S. Pg. 1. 15/marzo/2012.

9.- Abreu. Z.; L. Fidalgo.; Patología médica veterinaria. Zaragoza. España. Pg. 297. 17/marzo/2012.

10.- Mascotas. A.; 2012. Las enzimas hepáticas en los perros. Madrid. España. Pg.1-3. 111/marzo/2012.

11.- Lud. M.; 2000.; La enzimología. Madrid. España. Pg.3-8. 10/marzo/2012.

12.- Whitaker, J; 1972. Principles of enzimology for the food science. New York. United States. Pg. 3. 3/marzo/2012.

13.- SB5.; 2009.; Enzimología clínica, 2009. Madrid. España. Pg. 1-18. 6/marzo/2012.

14.- Bush. B: M.; 1999 Interpretación de los análisis de laboratorio para clínicos de pequeños animales. Enzimología.  Ediciones Hart Court. S.A. Ventura Rodriguez.  Madrid. España.  Pg. 367-370.

15.- Rusell. A.; 1982. Principios de patología veterinaria, Hepatitis infecciosa. Iowa, Usa. Pg. 555. 18/marzo/2012.

16. – Pike. B.;  2002. Aspartato amino transferasa. United States. Pg.1.
      
17. – Sánchez. G.; 2012. función hepática y parámetros analíticos. Aspartato amino transferasa. Madrid. España. Pg. 2. 13/marzo/2012.

18.- Barcena. J.; García. C.; 2010. Cinética enzimáticas. Córdoba. Argentina. Pg. 1. 2/marzo/2012.     http://www.uco.es/organiza/departamentos/bioquimicabmol/pdfs/30%20FOSFATASA%20ALCALINA.pdf

19.- buena salud.; 2012.  Fosfatasa alcalina. Argentina. Buenos Aires. Pg.1  15/marzo/2012.

20.- Widenhorn. N.; Scaglione. M.C.; Ritmos circadianos de la albúmina sanguinea   en caninos. Argentina. Pg. 3. 5/marzo/2012.    http://www.covetcba.com.ar/tools/publish_printversion.asp?path=html&ite1397

21. Wikipedia. 2012.; Albúmina. España. Pg. 1. 13/febrero/2012.

22.-Breininger. E. 2012. Proteínas séricas y patologías asociadas a las  disproteinemias. Buenos Aires. Argentina. PG.2. 26/marzo/2012.

23.- Wikipedia. 2012. Enzimas. España. Pg. 5. 12/marzo/2012.



















No hay comentarios:

Publicar un comentario